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活体细胞内p53与IκBα的相互作用及其核穿梭过程
  • ISSN号:1000-3282
  • 期刊名称:《生物化学与生物物理进展》
  • 时间:0
  • 分类:Q2[生物学—细胞生物学] Q6[生物学—生物物理学]
  • 作者机构:[1]华南师范大学激光生命科学研究所,广州510631, [2]暨南大学生物工程研究所,广州510632
  • 相关基金:国家自然科学基金面上项目(60378043,30470494)和广东省自然科学基金资助项目(015012,04010394),
中文摘要:

通过构建6种荧光融合蛋白质粒载体pECFP-IκBαt、pECFP-IκBαM、pECFP-IκBα243N、pECFP-IκBα44C、pp53-DsRed和pp53/47C-DsRed,应用激光共聚焦显微镜,观测静止细胞内p53与IκBα及其各种突变体的定位特点及相互作用关系,直观地说明了活体细胞内的p53可与IκBα的C端的PEST区发生相互作用,p53的N端也参与了p53-IκBα复合体的形成.同时,实时观测外界刺激下细胞内DsRed/CFP两荧光比值的变化,探讨p53-IκBα复合体形成与解离的动态平衡,细霉素B(leptomycinB,LMB)作用下细胞内p53与IκBα的动力学分布、及核穿梭动态过程的意义.IκBα蛋白可能已经成为p53和NF-κB信号通路的一个交叉点,从而扩展了对于这两条重要信号通路调控的认识.

英文摘要:

Six fluorescent fusion protein plasmids were constructed, and the location and interaction of p53 and IκBα(IκBα, IκBα243N and IκBα244C) in living cells were investigated with cyan (CFP) and red fluorescent protein(DsRed) fusion proteins by fluorescence resonance energy transfer, p53 interacts with the non-ankyrin C terminus PEST domain of IκBα and the N terminus in p53 plays an important role in the formation of p53-IκBα complex. The change of DsRed/CFP in response to UV-mediated DNA damage was observed in real time and the balance between p53-IκBα complex formation and dissociation was discussed. In addition, the shuttling of p53 and IκBα between cytoplasm and nucleus under LMB stimulation suggested that the relationship among NF-κB, p53, IκBα, Mdm2, and WOX1 is complicated and remains to be determined. IκBα has been an important cross-talk protein between p53 and NF-κB, and this might expand the understanding of these two signaling pathways considerably.

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期刊信息
  • 《生物化学与生物物理进展》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生物物理研究所 中国生物物理学会
  • 主编:王大成
  • 地址:北京市朝阳区大屯路15号
  • 邮编:100101
  • 邮箱:prog@sun5.ibp.ac.cn
  • 电话:010-64888459
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3282
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2161/Q
  • 邮发代号:2-816
  • 获奖情况:
  • 1999年中国期刊奖提名奖,2000年中国科学院优秀期刊特别奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18821