位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
发芽法与玻璃珠破碎法提取家蚕微孢子虫孢壳蛋白的双向电泳分析
  • ISSN号:0257-4799
  • 期刊名称:蚕业科学
  • 时间:2013.10.10
  • 页码:928-934
  • 分类:S884.21[农业科学—特种经济动物饲养;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆400716
  • 相关基金:国家自然科学基金重点项目(No.30930067),国家重点基础研究发展计划“973”项目(No.2012CBll4604),“十二·五”农村领域国家科技计划课题(No.2012AAl01301).
  • 相关项目:家蚕微孢子虫孢壁蛋白质组及其在侵染中的作用研究
中文摘要:

为了深入认识家蚕微孢子虫高分子量蛋白的主要组成,我们采用LC—MS/MS技术鉴定分析玻璃珠破碎法提取的家蚕微孢子虫总蛋白中85kD以上两条主要蛋白带。我们从H1带(位于150~200kD之间)中成功鉴定出16个蛋白,包括极管蛋白3(PTP3)、极管蛋白2(PTP2)、真核蛋白翻译起始因子(eIF2C2)、延伸因子(EFlalpha、EF2)、肌动蛋白(actin)等。这暗示两种结构蛋白PTP3与PTP2以及蛋白翻译延伸因子(EFlalpha、EF2)与肌动蛋白(actin)可能各形成一个复合体。并且用SDS或B一巯基乙醇处理时,这两个复合物是稳定的,表明这些复合物的相互作用力不仅仅是通过二硫键。H2带(85~100kD)鉴定出主要集中在水解酶、蛋白合成与折叠、细胞结构、运动四个方面的20多个的蛋白。从两条蛋白带鉴定出PTP3与PTP2、三磷酸腺苷酶(ATPase)或过渡期内质网三磷酸腺苷酶(ATPaseTER94)、蛋白翻译因子(eIF2C、EFl一alpha、EF2)、HSP70、Actin、M1家族氨肽酶1(M1familyaminopeptidase)6类蛋白。基于蛋白分子质量分析,暗示在家蚕微孢子虫中,这6类蛋白都可能是以复合体形式呈现的。研究结果丰富家蚕微孢子虫高分子量蛋白的数据,同时,为研究非二硫键间的蛋白互作提供了有价值的研究线索。

英文摘要:

In the post-genome era,the combination data with mass spectrometry (MS) provide an effective method for protein identification, and MS has been developed into a powerful tool for proteomics. Now, of Nosema bombycis proteins, only a few have been identified, inclu- ding some spore wall proteins and polar tube proteins. In order to obtain more information of N. bombycis proteins with big molecular weight,we used the technology of proteomics, LC- MS/MS, in this study to identify and analyze two abundant protein bands of glass bead-ex- tracted total proteins of N. bombycis. We successfully identified a total of 16 proteins in H1 (130--170 kDa) band, including polar tube protein 3 (PTP3), polar tube protein 2 (PTP2), eukaryotic translation initiation factor 2C 2 (eIF2C 2), elongation factor 1-alpha (EFI-al- pha), elongation factor 2 (EF2), actin and some others, thus suggesting that the two struc tural proteins (PTP2 and PTP3) could form a complex, and the translational related pro- teins, eukaryotic translation elongation factor 1-alpha(EFl-alpha), elongation factor 2 (EF2) and actin could form a big complex too. Treated with SDS or t3-Mercatoethanol, these two complexes were stable, which suggested that their ligation is not by the disulfide bond alone. Over 20 proteins were identified in the H2 band with a molecular weight size ranging from 85 kDa to 100 kDa, such as adenosine triphosphatas (ATPase) ,transitional endoplasmic reticu- lum ATPase TER94, M1 family aminopeptidase 1, transitional endoplasmic, PTP3, PTP2, elF2C 2,EF2,EF1 alpha and so on. According to functional analysis, these proteins mainly included the following four aspects, hydrolytic enzymes,protein synthesis and folding,cellu lar structure and movement. Our research results provide more basic data for proteome and some clues for further research of protein interaction in microsporidia.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《蚕业科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会 中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编:郭锡杰
  • 地址:江苏省镇江市四摆渡中国农业科学院蚕业研究所
  • 邮编:212018
  • 邮箱:CYKE@chinajournal.net.cn
  • 电话:0511-85616835
  • 国际标准刊号:ISSN:0257-4799
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1115/S
  • 邮发代号:28-23
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊,全国农业学会优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:7742