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miRNA-182对细胞内钠离子通道蛋白Nav1.7表达的影响
  • ISSN号:1671-6825
  • 期刊名称:《郑州大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q789[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:郑州大学基础医学院人体解剖学教研室,郑州450001
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目81671091,81471144
中文摘要:

目的:探索miRNA-182对细胞中电压门控钠离子通道1.7(Nav1.7)表达的影响及可能机制。方法:构建重组SCN9A 3'UTR双荧光素酶报告基因载体并与miRNA-182抑制物、类似物或scramble共转染HEK293细胞,通过荧光素酶活性检测观察miRNA-182和SCN9A表达的变化。用谷氨酸钠刺激PC12细胞并转染miRNA-182类似物或抑制物,利用原位杂交、免疫荧光共检测以及蛋白免疫印迹方法检测细胞中miRNA-182和Nav1.7蛋白的表达。结果:miRNA-182能抑制SCN9A 3'UTR在HEK293细胞中的表达。Nav1.7和miRNA-182在PC12细胞共表达。谷氨酸钠可使PC12细胞中Nav1.7表达增高,miRNA-182的表达降低(P〈0.05);miRNA-182类似物能拮抗谷氨酸钠的刺激作用。结论:miRNA-182可负调控细胞内Nav1.7蛋白的表达。

英文摘要:

Aim: To investigate the effect of miRNA-182 on the expression of voltage-gated sodium channel 1. 7 (Navl. 7) in cells and its possible mechanism. Methods: Recombinant double luciferase reporter vector carrying SCN9A 3'UTR was constructed and transfected into HEK293 cells binding with miRNA-182 agomir, antagomir or scramble, and the expressions of miRNA-182 and SCN9A were detected by luciferase assay system. Immunofluoreseenee, in situ hybrid- ization, and western blot were used to detect Navl. 7 and miRNA-182 in PC12 cells treated by glutamate and after transfect- ed with miRNA-182 agomir or antagomir. Results : miRNA-182 could inhibit the expression of SCN9A 3'UTR in HEK293 cells. Navl. 7 and miRNA-182 were co-expressed in PC12 ceils. The expression of Navl. 7 in PC12 cells with glutamate stimulation was significantly increased, while that of miRNA-182 was significantly decreased(P 〈 0.05 ) , miRNA-182 ag- omir could reverse the high expression of Navl. 7 protein in PC12 cells induced by glutamate. Conclusion: miRNA-182 could inhibit the expression of Navl. 7 protein in ceils.

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期刊信息
  • 《郑州大学学报:医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:河南省教育厅
  • 主办单位:郑州大学
  • 主编:辛世俊
  • 地址:郑州市高新区科学大道100号
  • 邮编:450001
  • 邮箱:xzshi@126.com
  • 电话:0371-67781728
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-6825
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1340/R
  • 邮发代号:36-111
  • 获奖情况:
  • 综合性医药卫生类核心期刊,教育部优秀科技期刊一等奖,中国优秀科技期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:15607