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果蝇血液标记基因srp原核表达质粒构建及多克隆抗体制备
  • ISSN号:1000-2537
  • 期刊名称:湖南师范大学自然科学学报
  • 时间:0
  • 页码:74-77
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]湖南师范大学蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,中国长沙410081
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30900851)
  • 相关项目:果蝇Yippee基因在心脏发育中的功能研究
中文摘要:

果蝇基因srp是血液发育的早期标记基因,为了研究果蝇这一模式动物中血液发育的详尽过程,通过提取野生型成体果蝇的总RNA,反转录获得其cDNA文库,设计引物克隆出srp基因,将所得片段插入原核表达载体pET28a中。经酶切和序列鉴定,成功构建重组质粒,并通过IPTG诱导表达出His-srp融合蛋白,经Ni-IDA凝胶柱纯化后,免疫新西兰大自兔制备srp多克隆抗体,为血液发育研究奠定了基础.

英文摘要:

Gene srp is a hematopoiesis marker in Drosophila. Reserve transcriptional PCR was performed using isolated total RNA from adult wild type. The part fragment of srp cDNA sequence was obtained by PCR amplification, cloned into prokaryotic expression pET-28a vector and identified with restriction enzyme and sequencing. The fusion protein was induced by IPTG, then purified by Ni-IDA gel column, and finally injected into New Zeal- and white rabbits to generate polyclonal antibody, which lays a foundation for blood developmental study to illuminate the elaborate process of hematopoiesis in Drosophila.

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期刊信息
  • 《湖南师范大学自然科学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:湖南师范大学
  • 主办单位:湖南师范大学
  • 主编:杨春明
  • 地址:湖南长沙岳麓山湖南师范大学期刊社
  • 邮编:410081
  • 邮箱:xbz@hunnu.edu.cn
  • 电话:0731-8872473
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2537
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1065/N
  • 邮发代号:42-96
  • 获奖情况:
  • 全国优秀科技期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:4771