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番茄果实高质量总RNA的提取富集及RT-PCR检测
  • ISSN号:1003-188X
  • 期刊名称:《农机化研究》
  • 时间:0
  • 分类:TS255.36[轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程;轻工技术与工程—食品科学与工程]
  • 作者机构:[1]中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30972037)
中文摘要:

以番茄果实为材料,比较了3种在果实中提取RNA的方法,针对番茄果实多糖的特点,利用无水乙醇和异丙醇联合沉淀的方法除去多糖,改良了Trizol法。为了检验含量比较低的miRNA,利用Licl沉淀的方法进行富集。结果表明:改良Trizol法能够有效地去除多糖,提取到的RNA 28S rRNA亮度约为18S rRNA的2倍,A260与A280比值为1.84,A260与A230比值为1.92,RNA产率为350.4μg/g,说明利用改良Trizol法从番茄果实中提取的RNA质量好、完整性好。由此法所得的RNA可直接用于cDNA文库构建等分子生物学实验。

英文摘要:

Trizol method,guanidine thiocyanate method and perchlorate method,were employed to extract total RNA in fruit of tomato.And Trizol method was accordingly modified in extracting the total RNA in tomato by integrating a polysaccharide-removing step in correspondence with the fact that tomato fruit was rich in polysaccharides and polyphenol.Due to the low content of miRNA,we were using Licl precipitation method to enrichment it.The results showed that the modified Trizol method was capable of efficiently removing polysaccharides,and that of the RNA extracted by the modified Trizol method,the lightness of 28 S RNA was two times as much as that of 18 S RNA,the value of A260/A280,A260/A230 was1.84,1.92;and the RNA yield reached 350.4μg/g,which explained that the modified Trizol method could extract high-quality and high-complete RNA at a higher productivity.This high quality RNA could meet the demands of molecular analysis,such as cDNA library construction.

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期刊信息
  • 《农机化研究》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:黑龙江省农业委员会
  • 主办单位:黑龙江省农业机械学会 黑龙江省农业机械工程科学研究院
  • 主编:李智
  • 地址:哈尔滨市南岗区哈平路156号
  • 邮编:150081
  • 邮箱:NJHYJ@VIP.SOHU.COM
  • 电话:0451-86662611
  • 国际标准刊号:ISSN:1003-188X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1233/S
  • 邮发代号:14-324
  • 获奖情况:
  • 《中国科学引文数据库》全文收录,《中国学术期刊综合评价数据库》全文收录,自1992年至今连续被确认为全国农业工程类期刊的核...
  • 国内外数据库收录:
  • 中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:25747