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小鼠IL-39的克隆及真核表达载体的构建
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:R392.11[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:宁波大学医学院免疫学研究室,浙江宁波315211
  • 相关基金:浙江省自然科学基金项目(“IL-37调控DC/Treg细胞诱导免疫耐受在支气管哮喘中的作用及分子机制”,No.LY17H010001); 浙江省公益技术应用研究项目(“IL-38转基因小鼠的建立及在高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中的作用”,No.2016C37139); 宁波市自然科学基金项目(“IL-37抑制博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的作用及机制”,No.2016A610088)
中文摘要:

[目的]构建小鼠白介素(interleukin,IL)-39单链融合基因及其真核表达载体。[方法]通过RT-PCR得到小鼠EB病毒诱导基因3(Epstein-Barr virus-induced gene 3,EBI3)及IL-23p19基因的全长编码区。通过重叠延伸PCR和编码疏水性多肽接头(linker)(Gly4Ser)3的DNA序列将小鼠EBI3全长编码区及IL-23p19成熟肽编码区连接起来,构建小鼠IL-39单链融合基因,并将其克隆至真核表达载体pc DNA3.1/V5-His中,通过限制性内切酶双酶切及基因测序鉴定阳性重组载体。[结果]通过重叠延伸PCR得到1 254 bp大小的目的条带,测序分析显示,小鼠IL-39单链融合基因中EBI3、linker和IL-23p19的基因序列及连接顺序和方向均完全正确。[结论]成功构建了小鼠IL-39单链融合基因及其真核表达载体。

英文摘要:

[Objective]To construct mouse single chain interleukin-39( IL-39) fusion gene and its eukaryotic expression vector. [Methods]The mouse Epstein-Barr virus-induced gene 3( EBI3) c DNA and IL-23p19 c DNA were amplified by RT-PCR. EBI3 whole coding sequence and IL-23p19 mature peptide coding sequence were fused via a hydrophobic polypeptide linker( Gly4Ser) 3 by overlap extension PCR to obtain mouse single chain IL-39 fusion gene. The mouse single chain IL-39 fusion gene was cloned into eukaryotic expression vector pc DNA3. 1/V5-His and the positive recombinant clone was analyzed by digestion of restriction endonuclease and DNA sequencing. [Results] Overlap extension PCR results showed that1 254 bp target band was obtained. The sequence analysis showed that the sequence,splicing order and orientation of mouse single chain IL-39 fusion gene were completely correct. [Conclusion] The research has successfully constructed the mouse single chain IL-39 fusion gene and its eukaryotic expression vector.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503