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人ω干扰素在毕赤酵母中的表达和纯化
  • ISSN号:0438-0479
  • 期刊名称:《厦门大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:TQ929.1[轻工技术与工程—发酵工程;化学工程]
  • 作者机构:[1]厦门大学生命科学学院,细胞应激生物学国家重点实验室,福建厦门361005, [2]厦门特宝生物工程股份有限公司,福建厦门361022
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31071611);国家基础科学人才培养基金项目(J1030626)
中文摘要:

ω干扰素(IFN-ω)是同IFN-α功能相近但抗原性不同的一类干扰素分子,它具有同IFN-α、IFN-γ以及肿瘤坏死因子α相似的抑制病毒复制的作用.采用5L发酵罐发酵表达IFN-ω,发酵培养液经超滤膜浓缩、SP层析柱梯度分离,得到糖基化的IFN-ω,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDITOF-TOFMS)和N端蛋白序列分析仪分析其分子质量和N端序列,用细胞病变抑制法测定活性.结果表明,诱导约48h时,目的蛋白表达量最高,通过SP梯度洗脱,可将糖基化和非糖基化的IFN-ω分离,质谱分析糖基化蛋白样品,质谱峰为糖基化蛋白特有的峰.纯化后糖基化的IFN-ω抗病毒活性为1.46×10^8U/mL.

英文摘要:

IFN -ω is a kind of interferon molecules,which has similar function hut different antigenicity to IFN-α. It can inhibit virus replication like IFN-α,IFN-γ and tumor necrosis factor alpha. 5 L fermenter was used to ferment and interferon-ω was expressed. Then,the glyeosylated interferon-ω was purified by a procedure stepped by ultrafiltration and gradient elution SP chromatography column. Its molecular weight and N amino acid sequence were analyzed by MALDI TOF TOF MS and the N protein sequence analy- zer,respectively. In addition,IFN-ω activity was determined by cell changes suppression method. The results showed that IFN-ω ex pression level reached to highest in induced 48 h. The glycosylated and unglycosylated IFN-ω could be separated by SP gradient elu- tion completely. The glycosylated IFN co showed a series of continuous peaks by mass spectrometry,which is the characteristic peak of glycosyl protein. The antiviral activity of the purified giycosylated IFN-ω was 1.46 ×10^8 U/mL.

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期刊信息
  • 《厦门大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:厦门大学
  • 主编:谢素原
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  • 邮箱:jxmu@xmu.edu.cn
  • 电话:0592-2180367 2187731
  • 国际标准刊号:ISSN:0438-0479
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1070/N
  • 邮发代号:34-8
  • 获奖情况:
  • 多次被评为全国、华东地区、福建省的优秀科技期刊,2001年入选国家新闻出版总署评定的"中国期刊方阵",2003年获国家新闻出版总署颁发的"第二届国家科技...,2006年获国家教育部科技司颁发的"首届中国高校精...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
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