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Ⅰ型鼠尾胶原三维培养模型对树突状细胞形态及分泌能力的影响

ISSN号：1000-2707
期刊名称：《贵州医科大学学报》
时间：0
分类：R392.12[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学] Q63[生物学—生物物理学]
作者机构：[1]贵州医科大学生物与工程学院,贵州贵阳550004, [2]贵州医科大学生物与医学工程重点实验室,贵州贵阳550004
相关基金：国家自然科学基金（31260227,11162003,31771014,11762006）;贵州省2011协同创新计划（2015-04）;贵州省科技创新人才团队（2015-4021）;教育部科学技术基金重点项目（210196）;贵州省科技厅科技合作项目（LH-2016-7375）;贵州医科大学博士启动基金（2014-024,2014-022）

关键词：树突状细胞, Ⅰ型鼠尾胶原, 三维培养模型, 凋亡, 白细胞介素, 免疫功能, dendritic cells, rat tail collagen I , three-dimensional cultivation model, apoptosis, in- terleukin , immune function

中文摘要：

目的：通过构建Ⅰ型鼠尾胶原三维（3D）培养模型,探索细胞外力学微环境对DCs产生的影响。方法：取健康人外周血来源的CD14＋单核细胞,利用重组人白介素-4（rh IL-4）和重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rh GM-CSF）共同诱导5 d,获得未成熟DCs（im DCs）,再利用重组人干扰素-γ（rh IFN-γ）和脂多糖（LPS）诱导im DCs为成熟DCs（m DCs）;再利用鼠尾肌腱提取Ⅰ型鼠尾胶原体外培养DCs;FITC-Annexin-V和碘化丙啶（PI）标记细胞,检测DCs的凋亡率;酶联免疫吸附测定法检测DC的白细胞介素-12（IL-12）、IL-18和IL-1β的分泌水平。结果：与对照组相比,3D力学环境处理后细胞形态发生改变,细胞早期凋亡率降低,IL-18和IL-1β的分泌能力发生下调（P〈0.05）。结论：细胞外3D力学微环境能够调控DCs的免疫功能。

英文摘要：

Objective： To study the effects of extracellular mechanical microenvironment on dendriticcells （DCs） by establishing three-dimensional rat tail collagen I cultivation model. Methods： CD14＋ peripheral blood mononuclear cells were induced to imDCs by recombinant human interleukin-4（ rhIL- 4） and recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor（rhGM-CSF） , and then induced to mDCs by recombinant human interferon γ（rhIFN-γ） and lipopolysaccharide （LPS） . Rat tail collagen I was extracted from rat tail tendon and then used to cultivate DCs in vitro. The cell apop- tosis were measured by FITC-Annexin-V and PI labeled cells. The cytokine production levels were measured by Elisa kit. Results： Compared with control group, the 3 D extracellular mechanical micro- environment could induce the morphological change, the ratio of early apoptosis were down-regulated, cytokine including IL-18 and IL-1β secretion capacity were down-regulated （ P 〈 0.05 ）. Conclusions： The 3D extracellular mechanical microenvironment could regulate the immune function of DCs.

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