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光诱导RNAi系统的构建及优化
  • ISSN号:1006-3080
  • 期刊名称:华东理工大学学报
  • 时间:2015.2.1
  • 页码:28-33
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]华东理工大学药学院、生物反应器工程国家重点实验室,上海200237
  • 相关基金:国家自然科学基金(31225008,31170815,31071260); 上海市科委“创新行动计划”基础研究重点项目(NO12JC1402900); 上海市曙光人才计划(11SG31); 高等学校博士学科点专项科研基金(20100074110010); 高等学校基本科研业务费
  • 相关项目:真核细胞光控基因表达系统
中文摘要:

利用光诱导基因表达系统,构建光诱导RNAi系统,并对系统转染比例、转录因子的表达量和shRNAmir表达载体的核心启动子进行优化。通过构建不同启动子的光敏转录因子GAVPO表达载体和不同核心启动子的shRNAmir表达载体,分析它们对报告基因的干扰效果的影响。结果表明,GAVPO的表达量对报告基因沉默效果和shRNAmir的背景表达水平至关重要。低表达量的GAVPO能够实现对报告基因的微调控,报告基因的表达量下降到约60%;而高表达量的GAVPO能够高效抑制报告基因表达,报告基因的表达量下降到34%。

英文摘要:

A light-inducible RNAi system was built by using the light-inducible gene expression system.The transfection mass ratio,the expression level of transcription factors and the core promoter of shRNAmir expression vector were optimized.We constructed transcription factor GAVPO expression vectors containing different promoter segments and the shRNAmir expression vectors with different core promoters,and assayed their effects on inhibition of gene expression.The results show that the GAVPO expression level plays an important role in gene silencing and background expression level of shRNAmir.Low expression level of GAVPO can tightly control expression of reporter gene,and reporter gene expression level decreased to about 60%;overexpression of GAVPO can efficiently inhibit the reporter gene expression,and reporter gene expression level decreased to 34%.

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期刊信息
  • 《华东理工大学学报:自然科学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:华东理工大学
  • 主编:刘红来
  • 地址:上海梅陇路130号
  • 邮编:200237
  • 邮箱:ecustxbbzz@ecust.edu.cn
  • 电话:021-64252666
  • 国际标准刊号:ISSN:1006-3080
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1691/TQ
  • 邮发代号:4-382
  • 获奖情况:
  • 2001年被国家新闻出版总署评为"中国期刊方阵科技...,2002年获"第五届全国石油和化工行业优秀期刊二等奖",2004年获"全国高校优秀科技期刊二等奖",2006年荣获"首届中国高校优秀科技期刊奖"以及"第...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,英国科学文摘数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10083