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抗CD3 ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体的高密度发酵与纯化
  • ISSN号:1005-8915
  • 期刊名称:《药物生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:Q936[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,天津300020
  • 相关基金:天津市科技发展计划项目(No.05WFGPGX06900)和国家自然科学基金资助项目(No.30400558).
中文摘要:

在发酵罐上采用高密度发酵的方法对抗CD3ScFv/抗PgPScFv双功能抗体工程菌进行了培养,其发酵结果是每升发酵液的湿菌菌重150g,OD550值达121;以免疫亲和层析的方法纯化抗CD3 ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体,经计算抗体产量可达146.6mg/L间接免疫荧光测定结果经流式细胞仪分析计算表明,抗CD3ScFv/抗PgPScFv双功能抗体能与Jurkat细胞及K562/A02细胞特异性结合。

英文摘要:

Plasmid pAYZDCP was introduced to E. coli 16C9, in which it could be expressed at high level. By optimizing the ferment parameters, during high cell density culture the final cell density OD(550) reaches 121 (150 g wet cell weigh/L). After the diabody was extracted from E. Coli and then purified by the immunoaffinity chromatography column. The yield of soluble antiCD3 ScFv/antiPgP ScFv diabody was 146. 6 mg/L. Its antigen binding activity, the diabody binding namely the activing of to Jurkat celIs(CD3^+) and K562/A02 cells(PgP^+) was examined by FACS. The affinities of the diabody were similar to the diabody which was obtained by shaking flask fermentation.

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期刊信息
  • 《药物生物技术》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中国药科大学 中国医药科技出版社 中国药学会
  • 主编:王旻
  • 地址:南京童家巷24号
  • 邮编:210009
  • 邮箱:ywswjs@cpu.deu.cn
  • 电话:025-83220372
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-8915
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1488/R
  • 邮发代号:28-243
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 被引量:6766