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旋毛虫重组35.5ku蛋白免疫诊断价值的研究
  • ISSN号:1673-5234
  • 期刊名称:中国病原生物学杂志
  • 时间:0
  • 页码:602-605
  • 分类:R383.15[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]郑州大学医学院寄生虫学教研室,河南郑州450052
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30972492,30972579,81141084);郑州大学研究生科学研究基金项目(No.10L00405Z).
  • 相关项目:旋毛虫未成熟与成熟幼虫共表达抗原的筛选及用于肉类检验的基础研究
中文摘要:

目的研究旋毛虫重组35.5ku蛋白的免疫诊断价值。方法通过RT-PCR扩增旋毛虫35.5ku蛋白基因TspSP-1.2,构建重组质粒pUC18-TspSP-1.2,测序正确后亚克隆至表达载体pET-30a(+)中,构建重组表达载体pET-30a(+)-TspSP-1.2,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白的抗原性。结果构建的重组表达载体pET-30a(+)-TspSP-1.2能够表达旋毛虫35.5ku蛋白,该重组蛋白可被旋毛虫感染小鼠血清、旋毛虫ES抗原免疫鼠血清及旋毛虫患者血清识别,与日本血吸虫、并殖吸虫、华支睾吸虫患者及正常人血清均无交叉反应,但与猪囊尾蚴患者血清有交叉反应。结论旋毛虫重组35.5ku蛋白可作为旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。

英文摘要:

Objective To study the immunodiagnostic value of the recombinant 35.5 ku protein of Trichinella spiralis.Methods The 35.5 ku protein gene(TspSP-1.2) was amplified by RT-PCR and a recombinant plasmid(pUC18-TspSP-1.2) was constructed.The target gene in the recombinant plasmid was sub-cloned into the prokaryotic expression vector pET-30a(+) and the recombinant expression vector pET-30a(+)-TspSP-1.2 was constructed.The recombinant plasmid was transformed into E.coli BL21(DE3) and induced with IPTG.The antigenicity of the recombinant protein was identified by SDS-PAGE and Western blotting.Results Western blotting showed that the recombinant 35.5 ku protein was recognized by the sera from mice infected with T.spiralis,mice immunized with ES antigens,and patients with trichinellosis but did not cross-react with sera from patients with schistosomiasis,paragonimiasis,or clonorchiasis or sera from healthy persons.The recombinant protein cross-reacted with sera from patients with cysticercosis.Conclusion The recombinant 35.5 ku protein of T.spiralis is a potential antigen for immunodiagnosis of trichinellosis.

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期刊信息
  • 《中国病原生物学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会 卫生部疾病控制司 山东省寄生虫病防治研究所
  • 主编:庄辉
  • 地址:山东省济宁市太白楼中路11号
  • 邮编:272033
  • 邮箱:www.cjpb.org
  • 电话:0537-2342934
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-5234
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5457/R
  • 邮发代号:24-81
  • 获奖情况:
  • 中华预防医学会、系列杂志优秀期刊,山东省优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8395