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舞毒蛾Ldcht10基因序列的克隆及其功能分析
  • ISSN号:2095-1353
  • 期刊名称:《应用昆虫学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]太原理工大学化学化工学院生物与制药工程系,太原030024
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31101490)
中文摘要:

【目的】研究舞毒蛾Lymantria dispar几丁质酶基因的时空表达特性及其在蜕皮发育过程中的生物学功能,筛选在舞毒蛾发育过程中致死性的几丁质酶基因,为实现基于RNAi的舞毒蛾有效控制提供重要的基础数据。【方法】设计简并引物克隆舞毒蛾几丁质酶基因Ldcht10关键序列,通过使用实时荧光定量PCR方法检测该基因在舞毒蛾不同龄期与组织中的相对表达量,选取部分序列的双链RNA(ds RNA)研究该基因功能。【结果】本研究克隆了长度为2 057 bp的舞毒蛾几丁质酶基因Ldcht10序列;各组织与不同龄期RT-PCR结果表明Ldcht10的时空表达特性存在明显差异,Ldcht10在各个龄期均表达活跃且在前肠与后肠中的表达水平最高;Ldcht10的RNA干扰试验表明:注射Ldcht10 ds RNA后Ldcht10的表达受到极大抑制,该基因被沉默后24.3%的舞毒蛾幼虫因无法完成蜕皮或化蛹而死亡。【结论】舞毒蛾中几丁质酶基因Ldcht10在各个龄期与组织中的表达存在差异,且在舞毒蛾蜕皮过程中具有十分重要的生物学功能,该基因被沉默后部分舞毒蛾因无法完成蜕皮而导致死亡。

英文摘要:

[Objectives] In order to provide a basis for effective pest control based on RNAi, the temporal and spatial expression, and the biological functions of the chitinase family of genes in Lymantria dispar were investigated and chitinase genes causing death during development were screened. [Methods] Degenerate primers were designed to clone the critical sequence of Ld Cht10 and the real-time quantitative PCR method was used to detect the relative expression level of Ld Cht10 in different instars and tissues of Lymantria dispar larvae. A fragment of the cloned sequence was chosen to study gene function using the RNA interference method. [Results] A critical sequence of Ld Cht10 of 2 057 bp in length was successfully cloned. The RT-PCR results show that the temporal and spatial expression patterns of Ld Cht10 were significantly different, and that the Ld Cht10 gene was expressed in all instars and tissues, with the highest expression occurring in the foregut and hindgut. RNA interference showed that 24.3% of test larvae died as a result of not completing molting and pupation after the gene was silenced. [Conclusion] The temporal and spatial expression profiles of Ld Cht10 were distinct in different instars and tissues. Based on the RNAi results, Ld Cht10 could play an important role in the molting process of L. dispar, and gene silencing can block ecdysis causing death in some larvae.

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期刊信息
  • 《应用昆虫学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国昆虫学会 中国科学院动物研究所
  • 主编:戈峰
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院5号中科院动物所
  • 邮编:100101
  • 邮箱:entom@ioz.ac.cn
  • 电话:010-64807137
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-1353
  • 国内统一刊号:ISSN:11-6020/Q
  • 邮发代号:2-151
  • 获奖情况:
  • 96、2000年获中科院《优秀期刊三等奖》,92年获中国科协《优秀学术期刊一等奖》,2001进入“中国期刊”方阵,“双百”期刊,排名第96位
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:3170