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农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的优化
  • ISSN号:1000-9841
  • 期刊名称:大豆科学
  • 时间:2015.10
  • 页码:-
  • 分类:S565.1[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心/作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室,江苏南京210095
  • 相关基金:转基因专项(2008ZX08004-004);国家自然科学基金(31171574,31101164);现代农业产业技术体系(CARS-004).
  • 相关项目:大豆对大豆花叶病毒抗性基因的鉴定、功能分析及育种利用
中文摘要:

利用农杆菌菌株EHAl05,对17个栽培大豆品种的大豆子叶节进行了侵染,从大豆基因型、氯气灭菌时间、外植体状态、菌株活力、侵染浓度、侵染时间、共培养时间等方面进行了优化。结果表明:氯气灭菌14~18h,可在不影响大豆种子活力的同时最大限度的减少污染;暗处理1d的外植体活力高于光照处理5~7d的外植体;菌液浓度(OD600nm)在0.8~1.0且侵染浓度OD600nm)为0.6~0.8时GUS瞬时表达率最高;适宜的侵染时间和共培养天数分圳为30min和4d。在上述优化研究基础上,形成一套综合的转基因体系,该体系的最高转化率可达3.33%。不同处理下的GUS瞬时表达率以及17个大豆品种的丛生芽诱导率综合评价显示,适宜转化的基因型为TL-1、HC-3、HC-6、Wil-liams82。

英文摘要:

In the present study, cotyledon nodes obtained from 17 soybean cuhivars were infected with Agrobacterium tume- facines EHA105. Subsequently, we optimized the soybean genotype, chlorine slerilization lime, explant state, vitality of bac- terial strain, concentration of infection liquid, infection time and co-cultivation time. As a result, when the chlorine steriliza- tion time was 14-18 h, the minimal pollution and the highest seed vigor was observed. The vitalily of overnight-treated explants in the dark were better than those germinated in the light for 5-7 d. The highest GUS transient rate was achieved when the bac- terial concentration at OD600nm was 0. 8-1.0 and the infection liquid at OD600nm was 0. 6-0.8. We also found that the best infec- tion and co-cultivation time were 30 rain and 4 d, respectively. Based on the above optimized research, we established a com- prehensive transgenic system which resulted in the maximum transformation efficiency of 3.33%. For the comprehensive eval- uation about the transient GUS expression under different treatments and the shoot induction rate of 17 soybean varieties, TL- 1, HC-3, HC-6 and Williams 82 were the ideal genotypes for transformation.

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期刊信息
  • 《大豆科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:黑龙江农业科学院
  • 主办单位:黑龙江省农业科学院编辑出版中心
  • 主编:刘忠堂
  • 地址:哈尔滨市南岗区学府路368号
  • 邮编:150086
  • 邮箱:dadoukx@sina.com
  • 电话:0451-86668735
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-9841
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1227/S
  • 邮发代号:14-95
  • 获奖情况:
  • 1988年获黑龙江优秀期刊奖,1996年获黑龙江省科技情报二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:12334