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小鼠Gtf2h2基因的克隆及其在真核细胞中的表达
  • ISSN号:1007-4368
  • 期刊名称:《南京医科大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:南京医科大学生殖医学国家重点实验室
  • 相关基金:国家重大科学研究计划项目(2014CB943200,2013CB945500);国家自然基金面上项目(31471351)
中文摘要:

目的:克隆小鼠Gtf2h2基因并使其在真核细胞HEK293中稳定表达。方法 :采用小鼠卵母细胞c DNA为模板,经PCR扩增Gtf2h2后,利用新型In-Fusion分子克隆体系将该目的片段克隆至真核表达载体p CMV6-AC-3DDK和p CMV6-ANm Kate中。所得阳性克隆的质粒DNA在经限制性酶切电泳和测序鉴定克隆成功后,转染到HEK293细胞中进行表达。表达效果利用抗DDK和m Kate标签的抗体通过免疫荧光以Western blot的方法进行检测。结果:质粒DNA测序和酶切鉴定证明Gtf2h2基因克隆成功;Western blot检测到GTF2H2-3DDK和GTF2H2-m Kate融合蛋白在转染后的HEK293细胞内的表达;免疫荧光显示融合蛋白在转染后的HEK293细胞核内定位并呈颗粒状分布。结论:成功克隆了小鼠Gtf2h2基因并实现了其在真核细胞HEK293中的稳定表达,为进一步研究其功能和作用机制奠定了基础。

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期刊信息
  • 《南京医科大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:
  • 主办单位:南京医科大学
  • 主编:沈洪兵
  • 地址:南京市龙眠大道101号
  • 邮编:211166
  • 邮箱:nyxb@njmu.edu.cn
  • 电话:025-86869293 86869297
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-4368
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1442/R
  • 邮发代号:28-61
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18896