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铁镍磁性微球直接纯化组氨酸标签蛋白
  • ISSN号:1004-1656
  • 期刊名称:化学研究与应用
  • 时间:2015.10.15
  • 页码:1569-1573
  • 分类:O611.3[理学—无机化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]大连民族大学生命科学学院生物技术与资源利用国家民委-教育部重点实验室,辽宁大连116600
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(生物体系外表达离子通道型细胞信号转导机能的超分子研究,21172028)及(固定化酶稳定的皮克林乳液的组装及其在手性催化中的应用,21203017)资助
  • 相关项目:固定化酶稳定的皮克林乳液的组装及其在手性催化中的应用
中文摘要:

以氯化铁与硫酸镍为主要原料基于热分解法原理一锅法合成铁镍磁性微球。氯化铁、硫酸镍和乙酸钠在(80℃)乙二醇中搅拌30 min,在氮气保护下,加入乙醇胺后180℃搅拌6h,经过水清洗与乙醇清洗后获得有磁性的含镍微球,XRD检测结果证实晶型为Ni Fe2O4,晶体的平均粒径为6.75 nm。磁性微球不经任何修饰直接与组氨酸标签蛋白结合,完成带有组氨酸标签的绿色荧光蛋白纯化,SDS-PAGE检测结果表明:使用5倍于镍配位凝胶质量的铁镍磁性微球可达到与镍配位凝胶相近的蛋白质吸附量。低成本的铁镍磁性微球可以替代镍配位凝胶用于组氨酸标签蛋白的分离纯化。

英文摘要:

The iron-nickel magnetic nanoparticle was synthesized with thermal decomposition method. Ferric chloride,nickel sulfate and sodium acetate were stirred in ethylene glycol at 80℃ for 30 minutes,and then stirred at 180℃ under the protection of nitrogen for 6 hours after the addition of ethanol amine,the iron-nickel magnetic nanoparticles were obtained with one pot method and were washed with water and ethanol. The nanoparticles could be dispersed in water and gathered in magnetic field. According to the XRD spectrum and the standard database,these results were obtained: the magnetic particle was cube,the crystal type was Ni Fe2O4,and the particle size was 6. 75 nm calculated with Scherrer formal. The His-tagged green fluorescent protein( GFP) was expressed in E-. coli under the induction of IPTG. The supernatant from the ultrasonic lysates was associated with the magnetic nanoparticles to purify the tagged GFP. The GFP was obtained with different elution buffers from the magnetic nanoparticles or Ni-NTA agarose and detected with SDS-PAGE. The results showed that the protein yield of Ni-NTA agarose was five times than the magnetic nanoparticles. The low-cost nickel-iron magnetic nanoparticles were obtained by the hydrothermal synthesis method,and could replace the NiNTA agarose to purify the tagged green fluorescent protein directly.

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期刊信息
  • 《化学研究与应用》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:四川省科学技术协会
  • 主办单位:四川省化学化工学会 四川大学
  • 主编:胡常伟
  • 地址:成都市武候区望江路29号四川大学化学学院内
  • 邮编:610064
  • 邮箱:chemra@scu.edu.cn
  • 电话:028-85418495
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-1656
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1378/O6
  • 邮发代号:62-180
  • 获奖情况:
  • 化学类中文核心期刊,美国化学文摘(CA)收录期刊,中国科学引文数据库来源期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:16918