中文摘要：

目的研究原癌基因受体酪氨酸激酶（recepteurd’origine nantais，RON）对Burkitt淋巴瘤细胞株Raji侵袭性行为的影响及单克隆抗体Zt／f2（2F2）的靶向抑制效应。方法采用RON特异性配体巨噬细胞刺激蛋白（macrophage stimulating protein，MSP）（2．0nmol／L）和Zt／f2（2F2）（2．0nmol／L）处理Raji细胞24和72h，采用MTT比色法研究对Raji细胞增殖的作用；采用甲基纤维素半固体培养法研究对Raji细胞克隆形成的作用；通过Annexin V／PI双染流式细胞术检测对Raji细胞凋亡和细胞周期的影响；采用Westernblot法检测RON的表达和凋亡相关蛋白及周期蛋白的改变。结果与空白对照组细胞活性（1．00）和集落数（103．6±7．0）比较，MSP处理72h后Raft细胞活性为1．35±0．20，集落数为133．7±10．4，而Zt／f2（2F2）单抗处理组细胞活性为0．68±0．11，集落数为66．3±6．1，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）；Zt／f2（2F2）单独处理组细胞凋亡率为（12．16±2．33）％，G0／G。期细胞所占比例为（54．96±3．70）％，与对照组细胞凋亡率[（2．89±1．03）％]、G0／G1期细胞所占比例[（39．10±2．30）％]比较差异均有统计学意义（P值均〈0．05）；Zt／f2（2F2）可以显著降低MSP刺激引起的RON磷酸化水平以及B—catenin蛋白的表达，且使凋亡蛋白caspase-3、-8、-9和多聚ADP核糖聚合酶表达水平增高，抗凋亡基因MCL-1和凋亡抑制蛋白XIAP表达水平下降，而且G．期周期蛋白相应改变。结论RON激活后促进Raji细胞恶性生物学行为；Zt／f2（2F2）可通过抑制Raji细胞RON磷酸化水平改变其G。期周期蛋白和相关凋亡蛋白的表达水平，实现抑制细胞增殖和诱导凋亡的目的。

英文摘要：

Objective To study the proto-oncogene RON mediated aggression of Raji cells and the inhibitory effects by monoclonal antibody Zt/f2 （2f2）. Methods The effects of RON ligand macro- phage stimulating protein （MSP） （2.0 nmol/L） and inhibitory Zt/f2 （2F2） （2.0 nmol/L） antibody on pro- liferation of RON positive Raji cells after treatment for 24 and72 hours were detected by MTT method, col- ony formation units （CFU） of Raji cells by methylcellulose semi solid culture, Raji cells apoptosis and cell cycle analysis by Annexin V/PI double staining, expression of RON, apoptosis-related proteins, and cyclins by Western blot. Results （1）Compared with the cell viability （1.0） and counts of CFU （103.6±7.0） in control group, Raji cells after MSP treatment had better viability （1.35±0.20） and CFU counts （133.7± 10.4） （P〈0.05）, but worse viability （0.68±0.11） and CFU counts （66.3±6.1） after Zt/f2 （2F2） treatment （P〈0.05）. （2）Percentage of Raji ceils apoptosis after Zt/f2 （2F2） antibody treatment （12.16±2.33）% was significantly increased than the control （2.89± 1.03）% （P〈0.05）. The percentage of Raji cells arrested in G0/G, phase was increased after Zt/f2 （2F2） antibody treatment as compared to the control [ （54.96± 3.70）% vs （39.10±2.30）%, （P〈0.05） ]. （3） High-level of RON phosphorylation and ~-catenin expression activated by MSP could be inhibited significantly by Zt/f2 （2F2）, which also up-regulated the expression of caspase-3, caspase-8, caspase-9 and PARP and down-regulated anti-apoptotic MCL-1 gene and inhibitor of apoptosis protein XIAP expression, accompanied with G1 phase protein changes accordingly. Conclusion MSP could aggravate Raji cells proliferation. Inversely, Zt/f2 （2F2） could inhibit proliferation and induce apoptosis by inhibition of RON phosphorylation and up-regulation of apoptosis related proteins.