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高灵敏纳米金比色芯片检测乙型肝炎病毒DNA及其变异
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中科院上海微系统与信息技术研究所传感技术联合国家重点实验室,上海200050, [2]郑州大学基础医学院微生物与免疫教研室,郑州450001
  • 相关基金:上海市科委纳米专项(Nos.11nm0505800,1052nm061000); 国家自然科学基金(No.31000791)资助项目
中文摘要:

构建了新型纳米金比色芯片,利用Taq DNA连接酶的连接特异性,将其与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)靶序列完全互补杂交的捕获探针(固定在芯片上)和纳米金修饰的探针连接成一条链,从而将纳米金颗粒固定到芯片点阵上,再通过银染反应放大,形成裸眼可见的显色信息。通过点阵的位置及灰度,即可判断HBV-DNA靶序列的单碱基突变,并得出相对定量信息。本实验对不同浓度的HBV-DNA靶序列进行了检测。结果显示:此技术对单碱基突变有很强的特异性识别能力,并且具有较高的灵敏度(约10pmol/L),在10~100pmol/L浓度范围内表现出较好的线性关系。该技术检测时间短(〈1h)、操作简单、不需要特殊的检测设备,具有很好的临床应用前景。

英文摘要:

Hepatitis B is a major disease which causes serious public health problems worldwide.Herein,a visual DNA microarray was developed for sensitive and specific detection of hepatitis B virus DNA(HBV-DNA) and single nucleotide polymorphisms.5′ end amino-modified oligonucleotide,which was immobilized on microarray surface acted as capture probe,and another part of gold nanoparticle-labeled oligonucleotide were designed to bind specifically to complementary targets HBV-DNAt,and then linked as a single-strand DNA via Taq DNA ligase.The black image of microarray spots,resulting from silver stain on gold nanoparticles,was used to detect visually target HBV-DNA and single nucleotide polymorphisms.Capture probe with single base mismatch was prepared to detect specificity and sensitivity of hybridization on microarray.Target HBV-DNA with different concentration had been tested,the result indicated that this method had good specificity in the discrimination of single nucleotide polymorphisms and showed high sensitivity(about 10 pmol/L).There is also a linear relationship between the signal intensity of microarray spots and the concentration of target DNA at the concentration range of 10-100 pmol/L.For its high sensitivity and good specificity,this visual detecting technique has potential applications in clinical fields.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455