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血清淀粉样P成分转基因小鼠模型的建立
  • ISSN号:0517-6611
  • 期刊名称:《安徽农业科学》
  • 时间:0
  • 分类:R392-33[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学] R392.11[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]西北农林科技大学动物科技学院,杨凌712100, [2]中国科学院上海生化细胞研究所,上海200031
  • 相关基金:国家自然科学基金(No.39925015)
中文摘要:

目的 制备小鼠SAP多克隆抗体,为进一步研究其功能和探讨其与炎症、肿瘤等疾病的相关性提供素材。方法 PCR扩增小鼠SAP基因编码区的DNA片段,将其重组人原核表达质粒PET30α(+),转化入大肠杆菌BL21中,异丙基β-D硫代办乳糖苷(IPTG)诱导产生His/mSAP融合蛋白,SDS-PAGE分析结果表明,蛋白主要以包涵体形式存在。采用割胶回收的方法纯化目的蛋白,免疫新西兰白兔,制备抗血清。通过ELISA、Western印迹来检测扰血清效价及特异性。结果 成功的构建了PET30α(+)/mSAP重组质粒,表达融合蛋白,免疫家兔所获得的mSAP多克隆抗体。结论 mSAP多克隆抗体特异性强。效价高。

英文摘要:

Objective To prepare mSAP polyclonal antibody and make it use widely in mSAP detection. Methods The DNA fragment of coding region of the mouse SAP gene was amplied by PCR, then cloned it in to the prokaryofic expressed vector, PET30α( + ). The recombinant plasmid was transierred into E. coil BL21. Fusion protein His/mSAP was expressed after IPTG was induced and isolated and purified from inclusion bodies. New Zealand rabbits were immunized with the purify fusion protein. The antiserum was detected by ELISA and Western blot. Resuits the prokaryotic expressed PET30α( + )/mSAP vector was successfully constructed, fusion protein His/mSAP was expressed efficiently. The polyclonal antibody was raised in the rabbits. Conclusion The mSAP antiserum re, veal high titer and specificity and maybe applicable in SAP function research.

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期刊信息
  • 《安徽农业科学》
  • 北大核心期刊(2008版)
  • 主管单位:安徽省农业科学院
  • 主办单位:安徽省农业科学院
  • 主编:曹淑华
  • 地址:合肥市庐阳区农科南路40号
  • 邮编:230031
  • 邮箱:ahnykx@163.com
  • 电话:0551-65148869 65160973
  • 国际标准刊号:ISSN:0517-6611
  • 国内统一刊号:ISSN:34-1076/S
  • 邮发代号:26-20
  • 获奖情况:
  • 1995年获安徽省优秀期刊三等奖,1998年获安徽省优秀期刊三等奖,2002年获第三届全国优秀农业期刊奖,2005年获第四届全国优秀农业期刊一等奖,2005年获安徽省优秀科技期刊一等奖,2006年获第五届全国农业期刊金犁奖学术类一等奖,第四届华东地区优秀期刊,2009年安徽省优秀期刊,RCCSE中国权威学术期刊(A+),中国农业核心期刊(2010)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版)
  • 被引量:163721