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FDA水解酶分析法表征近海泥滩微生物活性
  • ISSN号:0250-3301
  • 期刊名称:环境科学
  • 时间:2013.10.15
  • 页码:3818-3824
  • 分类:X830.2[环境科学与工程—环境工程]
  • 作者机构:[1]中国海洋大学环境科学与工程学院,青岛266100, [2]中国海洋大学海洋环境与生态教育部重点实验室,青岛266100
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(41176064)
  • 相关项目:黄河三角洲潮间带有机碳的生产和埋藏特征研究
中文摘要:

针对近海潮间带环境高盐、有机质组成复杂和微生物活性低的特点,根据微生物酶解荧光素双醋酸酯(FDA)产生荧光素的原理,建立了适于泥滩类潮间带沉积环境中微生物活性检测的荧光光度法.从样品浸提液、反应产物检测仪器、预处理方法、实验条件等不同方面进行优化,确定泥滩类潮间带沉积环境中微生物活性的最优检测方法和条件如下:沉积物湿样以灭菌陈海水为介质,加入吐温-80分散剂,充分振荡后静置,使较大颗粒自然沉降;取上层悬浊液,经无菌滤膜(1.2μm,多次煮沸灭菌)过滤,得到待测菌液;取待测菌液加入适量FDA溶液,在25~30℃下避光反应180 min,以丙酮为终止剂终止反应,25 min内以分子荧光光度计(激发波长488 nm,发射波长530 nm)测定反应产物的荧光强度,该方法的检测范围(以干重计)是3.0×103~1.1×105个·g-1.微生物活性以单位质量样品的荧光素含量表示(μg·g-1,干重).

英文摘要:

A method based on fluorescence spectrometry was developed to detect the microbial activities in marine mudflat sediment, where is characterized by high salinity, complex organic compounds and low microbial biomass. This paper optimized the sample extracts, the detection equipment for reaction products, the pretreatment methods, and the experimental conditions. The optimal procedure is described as following. Fresh sediment was first extracted with sterilized and aged seawater, followed by the addition of Tween-80 solution, then uniformly dispersed by thorough oscillating, and kept steady for precipitation. After filtration through a sterilized membrane ( 1.2 μm, sterilized in boiling water repeatedly) , the supernatant was supplemented with an appropriate amount of FDA solution and allowed to react in dark for 180 min at temperature ranged 25-30℃. The reaction was terminated by the addition of acetone, and the fluorescence intensity of the reaction mixture was measured within 25 min using a molecular fluorescence photometer at an excitation wavelength of 488 nm and an emission wavelength of 530 nm, and the detection range of this method (dry weight) was 3.0 × 10^3-1.1 × 10^5 ind.g 1. The microbial activity was reported as fluorescence content in per unit sediment mass ( μg.g-1 , dry weight).

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期刊信息
  • 《环境科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生态环境研究中心
  • 主编:赵进才
  • 地址:北京市2871信箱(海淀区双清路18号)
  • 邮编:100085
  • 邮箱:hjkx@rcees.ac.cn
  • 电话:010-62941102 62849343
  • 国际标准刊号:ISSN:0250-3301
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1895/X
  • 邮发代号:2-821
  • 获奖情况:
  • 在全国第一届和第二届优秀科技期刊评比中分别荣获...,二次荣获中国科学院优秀期刊评比一等奖,荣获中国期刊方阵双奖期刊荣誉
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
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