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采用高效液相色谱-质谱考察家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质的多样性
  • ISSN号:1000-8713
  • 期刊名称:《色谱》
  • 时间:0
  • 分类:O658[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]怀化学院生命科学系,民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室,湖南怀化418008, [2]湖南师范大学,蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室,湖南长沙410081
  • 相关基金:国家“973”计划项目(2010CB529800); 湖南省教育厅青年基金项目(13B087)
中文摘要:

家福捕鸟蛛(Selenocosmia jiafu)是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索,采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对粗毒多肽和蛋白质的多样性进行了分析。结果表明:家福捕鸟蛛粗毒经色谱分离后得到40多个色谱峰,经质谱鉴定得到238个多肽,且多肽的相对分子质量呈现出双峰分布,其中62.5%的多肽的相对分子质量分布在3 000-4 500之间,33.2%的多肽的相对分子质量分布在1 000-3 000之间。这种相对分子质量的分布模式不同于其他已经报道的蜘蛛粗毒中多肽的分布模式。电泳分析结果表明:除了相对分子质量在10 000以下的多肽分子,粗毒在50、72和90 kD附近有3条明显的条带,粗毒电泳条带经液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定,主要是一些血蓝蛋白、钾离子通道蛋白、钙蛋白酶等。说明家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质种类丰富。

英文摘要:

Selenocosmia jiafu( S. jiafu)is recently identified as a new species of spider in P. R. China. These medium bodied venomous spiders are distributed mainly in the hilly areas of southwest of China,mostly at Yunnan and Guangxi Provinces. In order to understand the composition of the S. jiafu venom,we performed a preliminary analysis of this venom using reversed-phase high performance liquid chromatography ( RP-HPLC ), matrix-assisted laser-desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry( MALDI-TOF-MS)and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis( SDS-PAGE). The S. jiafu venom was separated by RP-HPLC in an analytical C18 column(phenomenex 100 ?,250 mm×4. 6 mm,5 μm)equilibra-ted with solution A( distilled water with 0. 1% trifluoroacetic acid),using a gradient from 0%to 50% of solution B( acetonitrile with 0. 1% trifluoroacetic acid)over 50 min with a flow rate of 1 mL/min. The isolated venom proteins were treated with in-gel digestion separated by SDS-PAGE and then identified by liquid chromatography-electrospray ionization quadrupole-time of flight mass spectrometry( LC-ESI-QTOF-MS)techniques. The results show that more than 40 fractions eluted were monitored at 215 nm in the RP-HPLC chromatogram of the venom of the spider S. jiafu. Most of the fractions were eluted with retention times of 5-15 min and 25-40 min,corresponding to 5% -15% and 25% -40% acetonitrile,respectively. The venom contains 238 peptides that follow a bimodal distribution,with about 62. 5% of the peptides having a rela-tive molecular mass of 3 000-4 500 and about 33. 2% of the peptides having a relative molecular mass of 1 000-3 000. This distribution model is rather different from those of peptides from oth-er tarantula spider venoms analyzed. To explore the relative molecular mass distribution of the venom proteins,the venom was analyzed by SDS-PAGE using standard protocols. Except for peptides with relative molecular mass lower than 10 000, the SDS-PAGE electrophoresis revealed three

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期刊信息
  • 《色谱》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院大连化学物理研究所
  • 主编:张玉奎
  • 地址:大连市中山路457号
  • 邮编:116023
  • 邮箱:sepu@dicp.ac.cn
  • 电话:0411-84379021
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8713
  • 国内统一刊号:ISSN:21-1185/O6
  • 邮发代号:8-43
  • 获奖情况:
  • 1998年获中国科学院科学出版基金择优支持(1998-2...,2001年获第四届中国科学院优秀期刊二等奖,2002年获第三届中国科协优秀期刊三等奖,连续多年被评为辽宁省一级期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:26730