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龙眼14-3-3基因的克隆与原核表达
  • ISSN号:0513-353X
  • 期刊名称:《园艺学报》
  • 时间:0
  • 分类:S667.2[农业科学—果树学;农业科学—园艺学] Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]福建农林大学生命科学学院,福州350002, [2]福建农林大学园艺学院,福州350002, [3]福建省农业科学院果树研究所,福州350013
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30571293);教育部博士点基金项目(200803890009);福建省自然科学基金项目(2007J0045)
中文摘要:

以龙眼(Dimocarpus longanLour.)为试材,应用同源克隆和RACE方法从花芽中获得了调控蛋白14-3-3的全长cDNA序列,GenBank登录号为FJ479618(GI:218202931)。该cDNA全长1121bp,包括一个783bp的开放阅读框,编码261个氨基酸,序列比较分析显示14-3-3cDNA具有较高的保守性。半定量RT-PCR分析结果表明,14-3-3mRNA在龙眼叶芽、叶片、花芽和成熟的花中都有表达,但在花芽中表达量最大。构建了pET14-3-3原核表达系统,将14-3-3全长cDNA在大肠杆菌中表达,获得一个分子量约为34kD的可溶性融合蛋白,经Western blotting验证,该蛋白为14-3-3蛋白。

英文摘要:

Full length cDNA of 14-3-3 gene, encoding a plant regulatory factor, was isolated from longan (Dimocarpus longan Lout. ) using homology-based cloning and RACE methods. The accession number of the gene in GenBanks is FJ479618 (GI: 218202931 ). The full length eDNA is of I 121 bp, with a 783 bp open reading frame encoding 261 amino acids. Homology analysis showed that the longan 14-3-3 eDNA has high consensus regions. Semi-quantitative RT-PCR analysis detected the expression of 14-3-3 gene in longan foliar buds, leaves, mature flowers, and most up-regulated in flower buds. The prokaryotic expression vector was constructed and was expressed in E. coli; and a recombinant protein with a molecular weight of 34 kD was obtained by SDS-PAGE analysis. Western blotting confirmed the protein was 14-3-3 protein.

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期刊信息
  • 《园艺学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国园艺学会
  • 主编:杜永臣
  • 地址:北京市中关村南大街12号
  • 邮编:100081
  • 邮箱:ivfyyxb@mail.caas.net.cn
  • 电话:010-68919523
  • 国际标准刊号:ISSN:0513-353X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1924/S
  • 邮发代号:82-471
  • 获奖情况:
  • 第一届全国优秀期刊奖,中国科协第三届优秀期刊奖,第二届国家期刊奖提名奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:43371