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水稻可溶性OsVDAC5蛋白的外源表达及鉴定
  • ISSN号:0439-8114
  • 期刊名称:《湖北农业科学》
  • 时间:0
  • 分类:S511[农业科学—作物学] Q816[生物学—生物工程]
  • 作者机构:中南民族大学生命科学学院/生物技术国家民委重点实验室/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,武汉430074
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31170226)
中文摘要:

通过生物信息学分析确定水稻(Oryza sativa L.)Os VDAC5的可溶性肽段,将相应的编码区克隆于p GEX-4T-1原核表达载体中,进行IPTG诱导表达和GST亲和层析纯化,利用SDS-PAGE和Western Blot检测目的蛋白。结果表明,成功构建的p GEX-4T-1-Os VDAC5(1-75aa)原核表达载体,经过体外IPTG诱导,在35 k Da处可检测到可溶性目的蛋白,并获得外源蛋白表达的最适温度为15℃和最佳诱导时间为8 h;经过GST亲和层析,SDS-PAGE可检测到较为单一的蛋白条带,得到纯化的GST-Os VDAC5(1-75aa)融合蛋白。

英文摘要:

The soluble peptide of Oryza sativa L. OsVDAC5 was predicted by bioinformatics analysis and the coding region of this part was cloned into p GEX-4T-1 prokaryotic expression vector. Then the GST-Os VDAC5(1-75aa) fusion protein was induced by IPTG and purified by GST affinity chromatography. SDS-PAGE and Western Blot were used to detect the target protein. The p GEX-4T-1-Os VDAC5(1-75aa) prokaryotic expression vector was constructed. The results from SDS-PAGE and Western Blot showed that a soluble fusion protein expressed at about 35 k Da after being induced by IPTG in vitro. And the optimum temperature was 15 ℃ and the best induction time was 8 h. In addition, a single target protein band was detected and the purified GST-Os VDAC5(1-75aa) fusion protein was obtained by GST affinity chromatography.

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期刊信息
  • 《湖北农业科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:湖北省农业科学院
  • 主办单位:湖北省农业科学院 华中农业大学 长江大学
  • 主编:焦春海
  • 地址:武汉市武昌南湖瑶苑1号省农业科学院内
  • 邮编:430064
  • 邮箱:hbnykxxzz@126.com
  • 电话:027-87389334
  • 国际标准刊号:ISSN:0439-8114
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1255/S
  • 邮发代号:38-21
  • 获奖情况:
  • 国家期刊奖,全国农业核心期刊,湖北省优秀期刊,中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:30537