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细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗的构建及其表达效率研究
  • ISSN号:1000-8861
  • 期刊名称:《免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R383.33[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆400016
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30671835,30500423和30200239)
中文摘要:

目的构建细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗,分析啦95分子在该疫苗中的表达效率。方法超声粉碎细粒棘球蚴组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增印5的抗原编码基因;将该基因定向克隆到大肠杆菌.分枝杆菌穿梭表达载体pB-CG,构建重组质粒pBCG-Eg95;电穿孔法转化BCG,构建细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗。免疫印迹分析重组BCG-Eg95疫苗的表达产物。结果RT-PCR成功扩增出471bp的Eg95抗原编码基因;双酶切证实噬95抗原编码基因成功插入pBCG中;PCR证实rBCG-Eg95疫苗构建成功;免疫印迹分析发现重组BCG-Eg95疫苗的表达产物在相对分子质量(Mt)约为16.5×10^3处有明显的目的蛋白表达条带,且能被感染细粒棘球蚴的鼠血清特异识别。结论成功构建了细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗,为而后的开发利用奠定了理论基础。

英文摘要:

Objective To construct recombinant BCG-Eg95 vaccine of Echinococcus and analyze the expression efficiency of the gene encoding Eg95 antigen in rBCG. Methods The total RNA was extracted from hydatid cyst by ultrasound-breaking. Eg95 antigen gene amplified by RT-PCR from the total RNA was cloned into E. coli-Mycobacterium shuttle plasmid pBCG to construct pBCG-Eg95. The recombinant plasmid was electroporated into BCG to construct rBCG-Eg95 vaccine and the expression product of this vaccine was identified by Western blotting. Results Eg95 gene of 471 bp was successfully amplified by RT-PCR and cloned into pBCG by restriction analysis; rBCG- Eg95 vaccine was constructed successfully. The expression product with an approximate Mr of 16.5 ×10^3 could be recognized by sera from mice infected with CE. Conclusion rBCG-Eg95 vaccine of Echinococcus echinococcus is successfully constructed, which lays the theoretical foundation for exploitation and utilization of this vaccine.

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期刊信息
  • 《免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学 中国免疫学会
  • 主编:吴玉章
  • 地址:重庆市沙坪坝高滩岩
  • 邮编:400038
  • 邮箱:richard@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023-68752237
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8861
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1332/R
  • 邮发代号:78-32
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊三等奖,全军优秀医学期刊奖,重庆市优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:13273