目的探讨海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤保护作用.方法门静脉胶原酶Ⅳ原位灌注及密度梯度离心获得大鼠原代肝细胞.MTT实验检测乙醇和海兔素最佳作用剂量及肝细胞活力.酶学实验检测细胞AST、LDHSOD、MDA、GSH水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况;单细胞凝胶电泳观察细胞DNA损伤状况;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位水平;比色法及Westernblot检测细胞CYP2E1活性及蛋白表达.结果经30mg·L^-1海兔素预作用2h,再与300mmol·L^-1乙醇共作用8h后,肝细胞活力较酒精模型组明显上升,AST和LDH释放也得到明显抑制;同时,肝细胞SOD和GSH水平明显升高,MDA含量则明显降低,差异均具有显著性(P〈0.05).海兔素干预后,肝细胞凋亡率明显降低,DNA损伤及线粒体膜电位水平明显得到改善.海兔素干预后,肝细胞CYP2E1活性及蛋白表达水平明显受到抑制(P〈0.05).结论海兔素对大鼠原代肝细胞酒精性氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与海兔素抑制酒精对CYP2E1的活化,缓解氧化应激,提高机体抗氧化能力有关.