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低氧诱导因子-1α在成纤维细胞中的表达及对毛囊的影响
  • ISSN号:1000-4963
  • 期刊名称:《临床皮肤科杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R322.995[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学] Q291[生物学—细胞生物学]
  • 作者机构:[1]南京医科大学第一附属医院皮肤性病科,江苏南京210029
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30571678)
中文摘要:

目的:探讨外源性人低氧诱导因子(HIF)-1α基因在成纤维细胞中的表达及对体外培养人毛囊的影响。方法:通过脂质体将含有HIF—1α cDNA的真核表达载体pcDNA3.0瞬时转染成纤维细胞,应用反转录(RT)-PCR、免疫组化等方法检测HIF-1α在成纤维细胞中的表达。同时通过ELISA检测转染细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。进一步将该上清加至体外培养的人毛囊和细胞中,显微镜下测量毛囊的平均生长长度,并观察毛囊的形态学变化。并通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测加入转染上清的细胞活性。结果:成功地将HIF—1α真核表达载体HIF—1α pcDNA3.0瞬时转染了成纤维细胞,用RT-PCR、免疫组化染色可检测出细胞中HIF—1α的表达,MTT检测转染后细胞活性增强,并且该上清液可以检测出VEGF的表达。该上清可以明显促进体外培养的人毛囊生长.延缓其进入退行期。结论:应用脂质体能够成功地将外源性人HIF—1α基因转染成纤维细胞,并进行有效表达,其表达的HIF—1α可增强细胞活性,且可诱导转染细胞上清液中VEGF的表达,在体外具有促进人毛囊生长的生物学活性。

英文摘要:

Objective: To investigate the feasibility of transient transfection of human HIF-1α gene into fibroblasts and the effects of the transfected cell culture supernatant on human hair follicle in vitro. Methods: HIF-1α pcDNA3.0 was transiently transfected into fibroblasts with lipofectamine^TM 2000. Expression of HIF-1α was observed by RT-PCR and immunohistochemistry. The expression of VEGF in the supernatant of transfected cells was detected by ELISA. Further, the supernatant was added to the cultures of human hair follicles and cells in vitro. MTF method was used to detect the cell viability. Results: HIF-1α pcDNA3.0 was successfully transfected into these fibroblasts. The expression of VEGF in the culture supernatant of cells transfected with HIF-1α was detected. Moreover, the specific culture supernatant of transfected fibroblasts accelerated the growth of human hair follicles and prolonged their anagen phase,and the activity of cells was enhanced. ConcIusions: HIF-1α pcDNA3.0 is successfully transfected into the fibroblasts. The expression of HIF-1α enhances the cellular activity and induces the VEGF expression, and the expression of VEGF upregulates the growth of human hair follicle.

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期刊信息
  • 《临床皮肤科杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:江苏省卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
  • 主编:范卫新
  • 地址:南京市广州路300号
  • 邮编:210029
  • 邮箱:linpizazhi@163.com
  • 电话:025-83729951
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-4963
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1202/R
  • 邮发代号:28-7
  • 获奖情况:
  • 中国科技论文统计源期刊,全国优秀科技期刊,皮肤科学中文核心期刊,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:23499