位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
耐热木聚糖酶基因xyn11^EM在大肠杆菌中的表达
  • ISSN号:1673-1689
  • 期刊名称:《食品与生物技术学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]江南大学生物工程学院,江苏无锡214122, [2]江南大学无锡医学院,江苏无锡214122
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31271811).
中文摘要:

将人工合成经密码子优化的11家族耐热木聚糖酶基因xyn11^EM克隆至表达质粒pET-28a(+)中,获得重组质粒pET-28a-xyn11^EM。将其转化Escherichia coli BL21(DE3),构建表达耐热木聚糖酶的重组工程菌E. coli BL21/xyn11^EM。用IPTG诱导表达重组木聚糖酶Xyn11^EM(reXyn11^EM),酶活性可达47.5 U/mL。SDS-PAGE分析显示,reXyn11^EM的表观相对分子质量为24 800。reXyn11EM的最适反应温度为70 ℃,在70 ℃以下稳定。最适反应pH为6.5-7.0,在pH 5.0-8.0范围内稳定。大多数金属离子和EDTA对该重组酶的活性影响不大。reXyn11^EM的Km和Vmax值分别为7.2 mg/mL和54.7 U/mg。结果表明xyn11^EM成功在E. coli 中实现了异源表达,其良好的热稳定性具有较好的工业应用潜力。

英文摘要:

A codon-optimized gene (named xyn11^EM), which encodes a thermotolerant xylanase belonging to the glycoside hydrolase family 11, was synthesized, and cloned into the expression plasmid pET-28a (+). The recombinant Escherichia coli (designated E. coli BL21/xyn11^EM), expressing the thermostable xylanase,was constructed by transforming the recombinant plasmid, pET-28a-xyn11^EM,into E. coli BL21 (DE3). The recombinant E. coli BL21/xyn11^EM was induced with IPTG to express reXyn11^EM. The reXyn11^EM activity reached 47.5 U/mL. The apparent molecular weight of reXyn11^EM was estimated to be 24 800 by SDS-PAGE analysis. Its optimal temperature and pH were 70 ℃ and 7.0,respectively. It was stable at a temperature of 70℃ or below, and at a pH range of 5.0-8.0. Its activity was not significantly affected by most of metal ions tested and EDTA. The Km and of reXyn11^EM toward birchwood xylan were 7.2 mg/mL and 54.7U/mg. The excellent thermostability of reXyn11^EM make it has great potential in industrial application.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《食品与生物技术学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:江南大学
  • 主编:金征宇
  • 地址:江苏无锡蠡湖大道1800号江南大学蠡湖校区
  • 邮编:214122
  • 邮箱:zzs@jiangnan.edu.cn spyswjs@163.com
  • 电话:0510-85913526
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-1689
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1751/TS
  • 邮发代号:28-79
  • 获奖情况:
  • 全国轻工类中文核心期刊,全国食品工业类中文核心期刊,江苏省优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘
  • 被引量:9171