瞄准:为了调查 ESC-3 的效果,在生长和人的 cholangiocarcinoma 房间的 apoptosis 正式就职上从鳄鱼胆汁孤立。方法:ESC-3 被 Sephadex LH-20 和 RP-18 从鳄鱼胆汁孤立反向阶段的列。3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl )-2,5-diphenyl tetrazolium 溴化物试金被进行在人的 cholangiocarcinoma 房间行(QBC939, Sk-ChA-1 和 MZ-ChA-1 ) 的增长上决定 ESC-3 的效果。染色的 Giemsa, Hoechst 33258 和染色的氮蒽 orange/ethidium 溴化物显示出在不同集中暴露于 ESC-3 的 Mz-ChA-1 房间的词法变化。有染色的常规 propidium 碘化物(PI ) 的流动 cytometry 被执行 /PI 染色分析 Mz-ChA-1 房间的房间周期分发并且由 annexin v 荧光黄 isothiocyanate (V-FITC ) 估计 apoptosis。染色的 Rh123 被用来检测 mitochondrial 膜潜力(m) 的改变。Bax, Bcl-2, Cdk2,细胞色素 c 和 caspase-3 的蛋白质层次被西方的弄污进一步证实。结果:ESC-3 显著地禁止了在 G0/G1 的行和逮捕 Mz-ChA-1 细胞周期分阶段执行的三个人的 cholangiocarcinoma 细胞的生长。Mz-ChA-1 房间显示出典型 apoptotic 词法变化在为 48 h 与 ESC-3 (10 g/mL ) 对待以后。房间死亡试金显示 Mz-ChA-1 房间以 ESC-3 导致的一种剂量依赖者方式经历了 apoptosis。另外, ESC-3 处理能蛋白质 Bcl-2 和 upregulate 铺平的 downregulate Bax,在 Mz-ChA-1 房间在 Bax 的比率导致增加到 Bcl-2。同时,细胞色素 c 被免除线粒体进 cytosol,它随后开始了 caspase-3 的激活。所有这些事件与 mitochondrial 膜潜力的倒塌被联系。结论:ESC-3,鳄鱼胆汁的活跃成分,在通过线粒体依赖者小径的 Mz-ChA-1 房间的导致的 apoptosis 并且可以是为 cholangiocarcinoma 的处理的潜在的化学疗法的药。
AIM: To investigate the effects of ESC-3 isolated from crocodile bile on the growth and apoptosis induction of human cholangiocarcinoma cells.