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植物表达载体pCAMBIA2300-35S-GUS-CaMVterm的构建及验证
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:中国生物工程杂志
  • 时间:2013.3.3
  • 页码:86-91
  • 分类:Q812[生物学—生物工程]
  • 作者机构:[1]江苏省农业科学院经济作物研究所农业部长江下游棉花和油菜重点实验室,南京210014, [2]中国农业大学资源、环境及粮食安全中心教育部植物与土壤互作重点实验室,北京100193
  • 相关基金:国家自然科学基金(31070223)、江苏省自然科学基金(BK2010465)、江苏省博士后科研资助计划(1201031B)、国家转基因植物新品种培育科技重大专项(2011ZX08005-001)资助项目
  • 相关项目:发掘水稻转运和同化尿素的功能基因以探索氮肥高效利用的新途径
中文摘要:

为拓宽pCAMBIA2300表达载体的使用范围,进一步方便植物基因工程科研工作者在构建表达载体时的需要,利用SacⅠ和XhoⅠ双酶切pJIT166载体获取"35S-GUS-CaMVterm"片段,将该片段插入到pCAMBIA2300表达载体的多克隆位点区,构建完成了pCAMBIA2300-35S-GUS-CaMVterm表达载体。所构建的表达载体通过农杆菌介导转化拟南芥,获得拟南芥转基因植株,转基因植株的GUS染色结果进一步验证了本文所构建表达载体的正确性和实用性。该表达载体的成功构建,方便了构建基因超表达载体,以及使得研究启动子的活性及GUS组织化学定位成为可能,还可以通过GUS染色对转基因植物进行鉴定,为植物基因工程科研工作提供了一个较好的备选植物表达载体。

英文摘要:

Inorder to broaden the scope of use of plant expression vector pCAMBIA2300 and convenient to use for plant genetic engineering scientists in process of construction of expression vector, this research used SacⅠand XhoⅠdouble-digested pJIT166 vector obtaining 35S-GUS-CaMVterm fragment, then inserted this fragment to multiple cloning sites of pCAMBIA2300 vector, constructed the final expression vector pCAMBIA2300-35S-GUS-CaMVterm. The constructed expression vector was mediated by A. tumefacien (strain GV3101) using floral-dip method transformed to Arabidopsis thaliana. The GUS staining result of transgenic plants was further validated the correctness and practicality of this constructed vector. The construction of this expression vector was convenient for constructing gene over-expression vector,made it possible for studying promoter activity and GUS histochemical localization, and can also be used to identify transgenic plants. This constructed expression vector provided a better alternative plant expression vector for plant genetic engineering work.

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959