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抑制Runx2的表达增强BMP2诱导的干细胞成软骨分化
  • ISSN号:1671-8135
  • 期刊名称:《中国生物工程杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q254[生物学—细胞生物学]
  • 作者机构:重庆医科大学附属第一医院,重庆400016
  • 相关基金:国家自然科学基金面上项目(81371972)资助项目
中文摘要:

目的:利用腺病毒介导RNA干扰抑制成骨分化关键转录调控因子Runx2(Runt-related transcription factor 2)的表达,研究其对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成软骨分化的影响,并初步探讨相关机制。方法:利用腺病毒Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-SiRunx2感染C3H10T1/2细胞;共分4组:GFP组、BMP2组、BMP2+SiRunx2组和SiRunx2组。Alcian blue染色检测各组软骨细胞基质糖胺聚糖分泌;RTPCR检测Runx2、早期成软骨标志物(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)及晚期成软骨标志物(Col10a1)mRNA表达水平;Western blot检测目的蛋白BMP2、Ⅱ型胶原(Col2a1)及X型胶原(Col10a1)的蛋白表达。结果:在BMP2诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中,下调Runx2的表达可以增强Col2a1、Aggrecan及软骨细胞外基质糖胺聚糖的合成,抑制Col10a1的合成。结论:下调Runx2表达可以增强BMP2诱导间充质干细胞成软骨分化能力,并抑制软骨细胞的成熟和肥大。

英文摘要:

Objective:To investigate the potentiation effect of RNA silenced Runx2 on bone morphogenetic protein 2(BMP2)induced chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells(MSCs).Method:C3H10T1/2 cells were treated with adenovirus:Ad-BMP2,Ad-SiRunx2 or Ad-GFP.The sulfated glycosaminoglycan of cellular matrix was detected by Alcian Blue Staining.The mRNA level of Runx2,Col2a1,aggrecan,and Col10a1 were detected by RT-PCR,and the protein level of BMP2,Col2a1,Col10a1 were detected by Western blot.Results:The BMP2 + SiRunx2 group(C3H10T1/2 cells were treated with Ad BMP2 and Ad SiRunx2)was more blue than the BMP2 group on day 10 proven by Alcian blue staining.The BMP2 +SiRunx2 group showed a higher mRNA level of Col2a1 and aggrecan(P〈0.05)and a lower protein level of Col10a1(P〈0.05)than the BMP2 group on day 7 and 14.The BMP2 + SiRunx2 group showed a higher protein level of Col2a1(P〈0.05)and a lower protein level of Col10a1(P〈0.05)than the BMP2 group on day 10.Conclusion:The siRNA targeting Runx2 promotes BMP2-induced stem cell chondrogenic differentiation and supresses the chondrocyte hypertrophy and maturation.

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期刊信息
  • 《中国生物工程杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院文献情报中心 中国生物技术发展中心 中国生物工程学会
  • 主编:张树庸
  • 地址:北京市中关村北四环西路33号
  • 邮编:100080
  • 邮箱:biotech@mail.las.ac.cn
  • 电话:010-82624544 82626611-6631
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8135
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4816/Q
  • 邮发代号:82-673
  • 获奖情况:
  • 1991年中国科学院科技进步三等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12959