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IRX1真核表达载体的构建及在胃癌细胞SGC-7901中的定位
  • ISSN号:1001-9030
  • 期刊名称:中华实验外科杂志
  • 时间:0
  • 页码:884-886
  • 语言:中文
  • 分类:R735.2[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学] R780.2[医药卫生—口腔医学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]上海交通大学医学院附属瑞金医院消化外科研究所,200025
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30572127;30770961;30670939);科技部“863”重大专项资助项目(2006AA02A402;2006AA02A301);上海市科委重点基础研究项目(05JC14013);上海市浦江人才计划项目(PJ200700367)
  • 相关项目:胃癌5p15.33新靶区内候选抑癌基因IRX1的生物学功能解析
作者: 于颖彦|
中文摘要:

目的构建pEGFP—IRX1真核表达载体,体外转导至SGC-7901胃癌细胞株,观察IRX1基因转染后蛋白表达与细胞内定位。方法PCR扩增IRX1全长1443bp编码序列,将PCR扩增产物连接入pGEM-Teasy载体,经测序确认序列无误后,亚克隆入pEGFP—N1载体,构建pEGFP-IRX1真核表达载体。采用Lipofectamine2000转染SGC-7901胃癌细胞株,在荧光显微镜下观察外源性IRX1基因导入后在胃癌细胞内的表达与亚细胞定位。结果成功构建有绿色荧光蛋白融合的IRX1真核表达载体,外源性IRX1基因在胃癌SGC-7901细胞中表达成功,在荧光显微镜下IRX1表达蛋白定位于细胞核内。结论pEGFP—IRX1真核表达载体构建成功,并可在细胞内表达,这将为IRX1在胃癌内的功能研究奠定基础。

英文摘要:

Objective To construct the eukaryotic expression vector of pEGFP-IRX1 ,and observe the IRX1 protein expression and its sub-cellular localization in SGC-7901 gastric cancer cell line. Methods The coding sequence of IRX1 1443 bp was obtained by PCR amplification,then the PCR product was inserted into the pGEM-Teasy vector. After confirming the DNA sequence, IRX1 amplification product was sub-cloned into pEGFP-N1 vector. Finally, an IRX1 gene eukaryotic expression vector Was obtained. The pEGFP-IRX1 expression vector was transfected into SGC-7901 gastric cancer cell line by Lipofectamine 2000,and the expression of pEGFP-IRX1 was detected by GFP fluorescence. Results The recombinant vector was highly expressed in SGC-7901 cells. The green fluorescence of EGFP-IRX1 fusion protein was clearly localized in nuclei of gastric cancer cells. Conclusion pEGFP-IRX1 expression vector was constructed successfully,and the IRX1 protein was mainly observed in nuclei,which settled a basis for further functional study of gene IRX1 in gastric cancer.

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期刊信息
  • 《中华实验外科杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:
  • 地址:武汉市武昌区东湖路165号
  • 邮编:430064
  • 邮箱:cjes@cma.org.cn
  • 电话:027-87893475
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-9030
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1213/R
  • 邮发代号:38-85
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:34996