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位点特异性重组技术及其在寄生虫学研究中的应用
  • ISSN号:1673-5234
  • 期刊名称:中国病原生物学杂志
  • 时间:0
  • 页码:319-321+323
  • 分类:R382.31[医药卫生—医学寄生虫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]西安市中心医院检验科,陕西西安710003, [2]第四军医大学唐都医院放射科,陕西西安710038, [3]中国医科大学病原生物学教研室,辽宁沈阳110013
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30972572)
  • 相关项目:Flp/FRT技术敲除疟原虫SAP1和MSP-1基因对宿主免疫效应机制的研究
中文摘要:

目的构建含有约氏疟原虫SAP1(sporozoite asparagine-rich protein 1)截短基因的重组DNA疫苗,并进行鉴定。方法应用生物学信息软件预测分析并扩增SAP1截短基因,将该基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组表达载体pcDNA3.1(+)/SAP1。将重组载体转染COS-7细胞,进行体外瞬时表达并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果成功扩增SAP1截短基因并构建含有该基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/SAP1,其体外瞬时表达产物能与多克隆抗血清发生特异性结合反应。结论构建的重组DNA疫苗可在哺乳动物细胞中瞬时表达,表达的蛋白具有免疫反应性,其免疫保护作用有待进一步研究。

英文摘要:

Objective To construct and identify a recombinant DNA vaccine expressing the truncated SAP1 gene of the17 XL strain of Plasmodium yoelii. Methods The truncated SAP1 gene was predicted and analyzed using bioinformatics software and amplified using PCR.The amplified gene was cloned into the eukaryotic expression vector pcDNA3.1(+),and the recombinant expression vector pcDNA3.1(+)/SAP1 was constructed.COS-7cells were transfected with the recombinant expression vector and the expression of the recombinant protein was observed with indirect immunofluorescence.The recombinant protein was detected with SDS-PAGE and Western blotting. Results The truncated SAP1 gene was successfully amplified using PCR.The eukaryotic expression vector pcDNA3.1(+)/SAP1 was constructed and expressed transiently in vitro.The product of expression reacted specifically with polyclonal antiserum. Conclusion The recombinant DNA vaccine constructed here was expressed transiently in mammalian cells and the expressed protein was immunoreactive.The immunoprotective action of the vaccine needs to be studied further.

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期刊信息
  • 《中国病原生物学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会 卫生部疾病控制司 山东省寄生虫病防治研究所
  • 主编:庄辉
  • 地址:山东省济宁市太白楼中路11号
  • 邮编:272033
  • 邮箱:www.cjpb.org
  • 电话:0537-2342934
  • 国际标准刊号:ISSN:1673-5234
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5457/R
  • 邮发代号:24-81
  • 获奖情况:
  • 中华预防医学会、系列杂志优秀期刊,山东省优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8395