目的建立驴皮药材RAPD分析方法并用于伪品马皮的鉴别。方法采用化学试剂盒法确定了驴皮药材中DNA提取的最佳条件,采用L16(4^5)正交设计方法,针对Taq酶、Mg^2+、dNTP、模板DNA、引物设计了5因素4水平的正交试验,优化了RAPD.PCR反应条件。结果驴皮药材RAPD-PCR反应体系的最佳条件为25止反应体系中含有Taq酶1.5U、Mg^2+ 0.15mmol/L、dNTP0.25mmol/L、模板DNA1.5laL、引物0.5μmol/L;PCR反应条件为95℃预变性5min,94℃变性30S,37℃退火30S,72℃延伸1min,共30个循环,最后72℃延伸7min。RAPD反应结果中300-400bp处的条带可作为鉴别驴皮及其伪品的特异性条带。结论所建立的RAPD分析方法具有简便快捷、稳定性好、重现性高的特点,可用于驴皮药材及其伪品马皮的鉴别。