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多孔板-MTT比色法测定植物抗菌成分对细菌的抑制活性
  • ISSN号:1001-6880
  • 期刊名称:《天然产物研究与开发》
  • 时间:0
  • 分类:Q946.887[生物学—植物学] R285[医药卫生—中药学;医药卫生—中医学]
  • 作者机构:[1]中国农业大学农学与生物技术学院,北京100193, [2]贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室,贵阳550002
  • 相关基金:高等学校博士学科点专项科研基金(20060019048);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-05-0134);国家自然科学基金(30871662)
中文摘要:

多孔板-MTT比色法测定植物抗菌成分对细菌抑制活性的步骤为:每孔加入浓度为10^6cfu/mL的供试菌液90灿,然后加入不同浓度的药液10μL,28℃暗培养24h后,每孔中加入5mg/mL的MTT溶液10μL,继续培养4h后加入10%二甲基亚砜100μL,振荡30min,在570nm处测定溶液的吸光值。采用以上方法,测定植物抗菌成分蓝桉醇对辣椒斑点病黄单胞菌(Xanthomonas vesicatoria)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的半抑制浓度(IC50)分别为0.158和0.395mg/mL,小檗碱对溶血葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)的IC50为0.587mg/mL。结果表明,多孔板-MTT比色法能快速、微量地测定植物成分对细菌的抑制活性。

英文摘要:

An optimal experimental procedure with microplate-MTT colorimetric assay was obtained ,that was : 1 ) addition of 90 μL of bacterial suspension in concentration of 106 cfu/mL in each well of a 96-well micro plate ;2) then addition of 10 μL of the component solution with different concentration ;3 ) cultivation for 24 h at 28 0℃ in darkness ;4) then 10 μL of MTT solution in 5 mg/mL was added in each well;5) after incubation for another 4 h at 28 ℃ ,100 μL of 10% DMSO was added;6) after shaking for another 30 min ,light absorption values were obtained at 570 nm for the snpernatant with a micro plate spectrophotometer. As the optimal MTT assay mentioned above, globulol from Eucalyptus globulus fruits showed strong inhibitory activities against Xanthomonas vesicatoria and Bacillus subtilis that median effective inhib- itory concentration( IC50 ) were 0. 158 and 0. 395 mg/mL respectively. Berberine from Phellodendron chinertse fruits had its strong inhibitory activity against Staphylococcus haemolyticus obtaining 0. 587 mg/mL of IC50. This indicated that plant antibacterial components could be evaluated fast and micro-quantitatively by using microplate-MTT colorimetric assay.

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期刊信息
  • 《天然产物研究与开发》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院成都文献情报中心
  • 主编:方曙(执行)
  • 地址:成都市一环路南二段16号
  • 邮编:610041
  • 邮箱:trcw@clas.ac.cn
  • 电话:028-85210304
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-6880
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1335/Q
  • 邮发代号:62-107
  • 获奖情况:
  • 1996年被评为四川省首界优秀期刊,2000年被评为四川省第二界优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:29369