葡萄糖激酶催化葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸,是糖酵解的第一步反应,在野油菜黄单胞菌(Xcc)利用碳源代谢及其致病性中起重要作用。为了初步鉴定Xcc葡萄糖激酶基因功能,为研究其利用碳源相关代谢及致病性提供理论依据,以pQE30为表达载体,采用常规PCR技术对野油菜黄单胞菌Xcc8004基因组上注释为葡萄糖激酶的3个基因(XC1166、XCj223和XC1976)进行了克隆与表达,该3个基因在大肠杆菌JMl09中有较高表达量,经Mi^2+金属层析柱纯化后分别得到带有3个His的融合蛋白XC-1166-His6、XC-1223-His6和XC-1976-His6,分析表明仅XC-1976的表达产物具有葡萄糖激酶活性,为Xcc8004葡萄糖激酶基因,经测定XC-1976-His6的最适反应温度为45℃,最适pH值为7.1,最适反应条件下比活力为(380.6±1.123)U/mg。