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钝顶螺旋藻基因组质粒文库的构建及其在获得功能基因上的应用
  • ISSN号:1000-3096
  • 期刊名称:《海洋科学》
  • 时间:0
  • 分类:Q959[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]中国科学院海洋研究所,山东青岛266071, [2]中国科学院研究生院,北京100039
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30671065);中国科学院知识创新工程项目(KSCX2-YW-G-002,KZCX2-YW-209)
中文摘要:

利用改良的SDS法提取钝顶螺旋藻基因组DNA,经Sau3AI酶切,回收1~2kb大小的片段,与BamHI(Sau3AI的同尾酶)酶切并去磷酸化后的pBR322质粒载体相连接,转入大肠杆菌(Escherichia coli)Top10细胞,构建了螺旋藻基因组质粒文库。根据pBR322载体上多克隆位点两侧序列设计锚定引物,根据丝状蓝藻丝氨酸/苏氨酸激酶(STK)保守序列设计简并引物,以螺旋藻质粒文库为模板,“巢式”扩增出了STK基因部分序列。螺旋藻基因组质粒文库的构建为功能基因研究提供了极大方便。

英文摘要:

The genomic DNA isolated from Spirulina was digested by Sau3AI. The DNA fragments with length of 1-2 kb were cloned into plasmid vector pBR322 which was previously digested with BarnHI and dephosphorylated with calf alkaEne phosphatase. The recombinant plasmid was transformed into Escherichia coli Top10 competent cells and the genomic library was constructed. Using the anchor primer and degenerated primer, we obtain 5'end of STK in Spirulina from this genomic library.

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期刊信息
  • 《海洋科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院海洋研究所
  • 主编:侯一筠
  • 地址:青岛南海路7号
  • 邮编:266071
  • 邮箱:dehail@ms.qdio.ac.cn
  • 电话:0532-82898751
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3096
  • 国内统一刊号:ISSN:37-1151/P
  • 邮发代号:2-655
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21338