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快速ELISA法诊断血吸虫病的应用研究
  • ISSN号:1005-6661
  • 期刊名称:《中国血吸虫病防治杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R532.21[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]江苏省血吸虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室,无锡214064
  • 相关基金:国家重大科技专项(2008ZX10004-011); 江苏省卫生厅项目(H200738); 国家自然科学基金(30972581); 江苏省科技厅公益专项基金(BM2007704); 江苏省医学重点人才基金(RC2007095); 江苏省自然科学基金(BK2008110)
中文摘要:

目的对快速酶联免疫吸附试验(ELISA)的血吸虫病诊断实验条件进行优化,并观察其应用价值。方法同时将抗原、待测血清、HRP-SPA共置进行反应,替代常规ELISA法的分步反应。通过比较不同稀释度HRP-SPA的检测效果,确定其最佳工作浓度。观察待测血清和HRP-SPA不同混合反应时间对检测效果的影响,优化快速ELISA法的检测条件。用快速ELISA法、常规ELISA法和胶体染料试纸条法(DDIA)平行检测慢性血吸虫病人、华支睾吸虫病人及健康人血清,观察快速ELISA法的血吸虫病诊断实用价值。结果 HRP-SPA的最佳工作浓度为1∶2 000,待测血清和HRP-SPA最佳混合反应条件是37℃同步反应60 min。快速ELISA法检测慢性血吸虫病人血清抗体阳性检出率为93.8%,与华支睾吸虫病人血清的交叉反应率为4.0%,检测健康人血清的假阳性率为1.5%,与常规ELISA法和DDIA检测结果相似。结论快速ELISA法具有快速、简便等优点,是一种简便实用的血吸虫病免疫诊断方法。

英文摘要:

Objective To optimize the experimental conditions of fast enzyme-linked immunosorbent assay(F-ELISA) and evaluate its performance for immunodiagnosis of schistosomiasis japonica.Methods HRP-SPA was used at different concentrations in the assay to determine the best HRP-SPA concentration by comparing the detection accuracy.The working conditions of F-ELISA were optimized by examining the ratio of absorbance values of positive and negative controls with different incubation time of serum samples and HRP-SPA.To evaluate the performance of F-ELISA in diagnosis of schistosomiasis,the detection accuracy of F-ELISA was compared with routine ELISA and dipstick dye immunoassay(DDIA) by testing serum samples from both healthy subjects and those clinically diagnosed with schistosomiasis and clonorchiasis in parallel.Results In F-ELISA,the best working concentration of HRP-SPA was 1∶2 000 while the optimized incubation condition for serum samples and HRP-SPA was 60 min at 37 ℃.Using F-ELISA,we identified 93.8% to be schistosomiasis positive among chronic schistosomiasis subjects,4% within the clonorchiasis group,and a false positive rate of 1.5% in healthy individuals.This diagnostic accuracy for F-ELISA was similar to routine ELISA and DDIA.Conclusions F-ELISA combines the 2-steps of routine ELISA into a single step making the assay process faster and simpler without sacrificing the diagnostic accuracy.With further investigations,F-ELISA as an easy and practical method is promising to be applied for schistosomiasis diagnosis in the field.

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期刊信息
  • 《中国血吸虫病防治杂志》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:江苏省血吸虫病防治研究所 中华预防医学会
  • 主编:周晓农
  • 地址:江苏省无锡市梅园
  • 邮编:214064
  • 邮箱:xfbjb@vip.163.com
  • 电话:0510-68781021 68781022
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-6661
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1374/R
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 第三届国家期刊奖提名奖,中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖,卫生部首届医药卫生优秀期刊一等奖,第二届江苏期刊方阵优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物医学检索系统,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:8477