本项目以秦巴山区药用苔藓大金发藓为研究材料,选择不同白血病细胞系为细胞模型,通过离体实验进行大金发藓有效抗癌成分选择性诱导白血病细胞凋亡的信号转导通路和分子生物学机制研究,并建立L1210荷瘤小鼠实验动物模型开展在体抗癌研究。本研究通过高效液相色谱、质谱、核磁共振和红外光谱技术分离纯化大金发藓有效抗癌成分;应用免疫荧光、免疫印迹和RT-PCR技术分析细胞内凋亡相关蛋白和Caspase家族蛋白的表达活化,通过加入内、外源性凋亡通路特异性Caspase抑制剂,揭示大金发藓诱导白血病细胞凋亡的信号转导通路;利用小动物活体成像、电镜及分子生物学技术分析不同给药方式下荷瘤小鼠体内肿瘤生长抑制状况、体重和存活期变化、肿瘤组织超微结构变化和凋亡相关蛋白表达,求证大金发藓有效抗癌成分在离体实验和在体研究抗癌机制的一致性和差异。以期从细胞及在体水平阐明大金发藓有效抗癌成分诱导白血病细胞凋亡的分子生物学机制。
英文主题词Polytrichum commune L.ex Hedw.;Leukemia;ROS;Ca2+;Apoptosis