中文摘要：

为进一步明确DAZAP2基因下调在多发性骨髓瘤疾病中的作用，我们分析了DAZAP2基因上游启动子区域。然后将该启动子区域的一段序列克隆至荧光素酶报告基因载体,并且将通过Sss I甲基化酶处理后的片段插入到荧光素酶报告基因载体，转染COS-7细胞，检测荧光素酶活性，显示该区域有很强的活性。经过甲基化酶处理后，酶活性受到抑制，表明DAZAP2基因启动子甲基化与DAZAP2基因表达下调有关。采用分段克隆法，找到了该启动子核心区域。用MSP分析了KM3和ARH-77细胞中DAZAP2基因启动子的高甲基化，发现DAZAP2基因表达下调的KM3细胞经过5-aza-dc处理后，DAZAP2的表达得到恢复。DAZAP2启动子的高甲基化与其表达下调呈显著的负相关，说明多发性骨髓瘤中DAZAP2基因启动子的高甲基化在其表达下调中可能起到重要的作用。使用亚硫酸盐-基因组测序法（BGS）分析 DAZAP2启动子区域中的甲基化位点，并对AP-2、CREB、c-Rel 三个转录因子结合位点进行分析。证实通过甲基化结合位点中的胞嘧啶，能抑制某些转录因子与其结合，导致基因表达下调。