中文摘要：

将自主型有转座活性的西方蜜蜂mariner转座子Ammar1改造为蜜蜂转基因载体。所建载体使用西方蜜蜂actin /ubiquitin的启动子，以增强型绿色荧光蛋白（3×P3-EGFP）为转基因蜜蜂筛选标记。以显微注射法把所构建的自主型转基因载体和相应非自主型协助载体导入发生第一次分裂前的受精卵和非受精卵内。紫外检测不同发育时期的个体。以Southern检测转基因蜜蜂插入基因组中的外源DNA拷贝数

结论摘要：

采用精子介导法、电穿孔技术、显微注射技术、王浆介导法对东、西方蜜蜂进行了转基因研究。研究发现，将成熟精子与线性化质粒DNA共孵育后作人工授精，外源GFP/EGFP基因（CMV启动子驱动）在G1代小幼虫中表达较强，但表达水平随着幼虫的发育逐渐降低，而在G2代个体中没有检测到外源DNA。研究首次在中华蜜蜂中实现了外源基因的表达。对早、晚期卵电穿孔导入外源基因的技术进行了系统研究，获得优化的电穿孔电击参数中蜂卵(750v/cm,100μs,1)、意大利蜂卵(750v/cm,160μs,1)。在显微注射法作了大量工作，但在注射后的卵的培养上遇到瓶颈，卵存活率和孵化率极低。现正在使用PiggyBac载体系统继续进行研究和改进。尝试了蜂王浆介导法，但并未能成功转染。此外，对中蜂毒腺cDNA文库进行了5'EST测序分析，共获得1121条EST，代表944个独立基因，并进行功能注释、丰度分析和功能分类。建立了西雄蜂头部5' LongSAGE文库，获得40603个Tag，代表23270个非冗余转录本，进行了丰度分析，并用Tag标定了蜜蜂基因的转录起始点。该工作对蜜蜂基因组计划作了重要补充。