本项目以严重感染猪并具有公共卫生意义的猪蛔虫作为研究对象,成功地构建了猪蛔虫感染性幼虫差异表达的cDNA文库,制备了其表达谱芯片,应用该芯片和半定量RT-PCR技术鉴定出在感染期幼虫差异表达或特异表达的基因,对91个在感染期幼虫差异表达的基因EST进行了生物信息学分析,这些基因编码的蛋白主要包括蛋白激酶或磷酸酶、烯醇化酶、神经肽样多肽及其前体、小热休克蛋白、Poly A 结合蛋白、核糖体蛋白大亚基家族成员及PDZ结构域包含蛋白等。应用RNA干涉技术对4个在感染期幼虫特异或差异表达的基因进行了沉默。小白鼠实验发现烯醇化酶基因及06G09基因与猪蛔虫幼虫发育密切相关;烯醇化酶基因DNA疫苗免疫小鼠,能够有效地刺激机体产生体液免疫和细胞免疫,具有较好的免疫保护作用。获得了猪蛔虫烯醇化酶基因的全长cDNA,发现不同物种间该基因编码的氨基酸高度保守;预测了其编码蛋白的结构。本项研究成果不仅为在分子水平阐明猪蛔虫的发育生物学奠定了基础,并鉴定出可能用于猪蛔虫免疫预防或化学防治的新的潜在"关键"分子。
英文主题词Ascaris suum; Infective third stage larvae; DNA microassay analysis; Gene expression; Gene function