本研究对金属基底及金、银纳米粒子进行特征抗体修饰,利用修饰抗体对抗原的选择性识别及金、银纳米粒子与金属基底间电磁偶合对拉曼散射的有效增强效应,以标记物分子的增强拉曼散射信号间接表达抗体对抗原的选择识别作用,从而极大地提高抗原检测灵敏度。在此基础上进一步通过不同光谱特征分子对不同抗体金、银纳米粒子进行对应标记,探索多组分抗原同时识别检测,利用表面增强拉曼光谱的高灵敏性和抗体/抗原相互作用的高选择性建立应用表面拉曼光谱技术进行免疫检测的新方法。
本研究基于类似三明治结构的构建,对金属基底及纳米粒子进行抗体修饰,基底上的固相抗体与标记抗体通过与抗原的结合形成"固相抗体-待测抗原-标记抗体"夹心复合物,利用修饰抗体对抗原的特异选择性识别及纳米粒子与金属基底间的电磁耦合对拉曼散射的有效增强效应,以标记物分子的表面增强拉曼信号间接表达抗体对抗原的识别作用。研究通过采用金纳米及新型金银核壳纳米粒子作为SERS溶胶基底,结合适合的散射截面较大的SERS标记分子,极大地提高了抗原检测灵敏度。并在此基础上进一步通过不同光谱特征分子对不同免疫溶胶进行对应标记,成功进行了多组分抗原的同时识别检测。同时对固相金属基底的再生性进行了研究,通过探索合适的洗脱试剂进行基底再生,得到了较好的效果。