中文摘要：

柱花草（Stylosanthes spp.）又名笔花豆，是一类优良的热带豆科牧草,已在我国华南热带、南亚热带地区大积面积种植并利用。柱花草炭疽病是目前生产上主要的限制性因素,它是一种真菌病害。其病原菌的遗传多样性与流行性已进行了研究，但至今国内外还没有关于柱花草对炭疽病的抗性机制报道。本项目通过对不同柱花草种质对炭疽病的抗性鉴定，分离纯化柱花草抗真菌蛋白并克隆其基因、以及该基因在大肠杆菌中表达及其表达产物的抑菌功能，进一研究该基因在感病与抗病柱花草中的表达差异。阐明柱花草对炭疽病的抗性机制，将对柱花草的抗炭疽病育种研究有巨大的推动作用和深远的科学意义。

结论摘要：

采用盆栽植株和离体叶片接种方法，研究了45份柱花草种质对柱花草胶孢炭疽病原菌生理小种CATAS292（A型）和CATAS100（B型）的反应，鉴定出了高度抗病的Mineirao柱花草和高度感病的CIAT2312柱花草。对其叶片结构和蛋白质进行了比较Mineirao柱花草叶片上表皮刚毛较多、上表皮厚、上表皮细胞近于长方形，而CIAT2312柱花草上表皮近于线形；Mineirao柱花草的可溶性蛋白有一定的抑菌作用，其全蛋白质双向电泳分析经银染后有3个显著差异点。在炭疽病原菌诱导下，Mineirao柱花草的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、超氧化物岐化酶(SOD)的活性均高于CIAT2312柱花草。同时，建立了柱花草叶片组织总RNA的提取方法，并从Mineirao柱花草中克隆了PAL基因和MSRA基因。通过半定量PCR分析，PAL基因表达量高于感病的CIAT2312柱花草。