生物冶金中使用的自养菌氧化速率低、氧化周期长一直是该技术应用的瓶颈。对自养菌进行遗传改造,提高其应用效能是目前急需解决的问题。喜温硫杆菌是优势浸矿菌,尚未见相关研究报道。本研究的创新点在于1)对喜温硫杆菌MTH-04硫氧化系统的生物信息学分析,发现该菌含有两套不完整的SOX硫氧化系统和一些关键酶基因。2)首次将嗜酸性喜温硫杆菌硫氧化系统中的关键酶-连四硫酸盐水解酶基因(tetH)、硫氧化还原酶基因(sor)和硫化物-辅酶Q基因(sqr),通过电转化技术分别成功地导入A. caldus MTH-04,构建了工程菌 A. caldus (pJRD215-P1-tetH)、A. caldus (pJRD215-tac-tetH)、A. caldus (pJRD215-tac-sor)、A. caldus (pJRD215-tac-sqr)和A. caldus(pJRD215)。3)证明了高表达上述基因后表达量有所提高,对菌体生长具有促进作用。4)证明了tac启动子强于A. caldus自身启动子。5)为提高硫氧化能力相关研究提供方法借鉴和理论依据。
英文主题词biological metallurgy;Acidithiobacillus caldus;molecular modification of sulfur metabolism;electrotransformation;bioleaching ability