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棉花抗黄萎病相关基因功能鉴定与表达分析
  • 项目名称:棉花抗黄萎病相关基因功能鉴定与表达分析
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30871562
  • 申请代码:C130406
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2009-01-01-2011-12-31
  • 项目负责人:张桂寅
  • 负责人职称:研究员
  • 依托单位:河北农业大学
  • 批准年度:2008
中文摘要:

本研究以项目组前期克隆的候选基因GhGST、GbSTK和GbVe为研究对象,采用半定量RT-PCR或实时定量RT-PCR技术,研究并明确了候选基因GhGST、GbSTK和GbVe的时空表达特性。GhGST在棉苗根中的表达量明显高于茎和叶。在黄萎病菌胁迫条件下,GhGST在根中的表达量较未接种对照明显增加。GbSTK在接种前表达量很低,但接种后4h表达量开始增强,24h时基因表达量明显增强,且一直持续到48h。Ve基因在棉苗根中的表达量明显高于茎和叶,且在抗、感棉花品种呈现不同的表达模式,说明这些基因参与了棉花黄萎病抗病反应。成功构建了候选基因的原核表达载体,并成功实现了目标蛋白的原核表达。构建了候选基因的融合表达载体,通过基因枪轰击洋葱表皮细胞,将GbSTK定位于细胞骨架,GbVe定位于细胞膜。同时还构建了候选基因的真核过表达载体,农杆菌介导转化烟草或拟南芥,获得了转基因烟草或拟南芥纯合株系,并分析了基因的生物学功能,转基因烟草或拟南芥的黄萎病抗性明显得到提高。

结论摘要:

英文主题词cotton; resistant genes related to Verticillium wilt; funtional identification; expression characteristic


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