这项研究的内容是研究蛆分泌物的抗菌成份及蛋白溶解酶成份。蛆疗法已被大量的病例证明是一种彻底清创的有效的方法,其主要的优点体现在(1)它对久不愈合的创面能相对快速而精确地达到完全清创目的,它可以清除细菌,消除感染,包括耐药菌感染;(2)它不会损伤健康组织而且能促进肉芽组织的生长;(3)它不受创面位置、血运的影响,并可以促进坏死组织与健康组织分离,对血运不好的创面效果尤佳;(4)对于糖尿病脚它可以延缓甚至免除截肢术,提高有创面植皮的成活率;(5)该疗法还可以减少患者的住院时间,减少抗生素的用量,降低医疗费用。其缺点主要是美感上的缺陷,心理上不易接收,其它有的病人会出现如疼痛、发热等并发症。本项研究对明确蛆对创面的生物作用的机理,开发新药物有重要的意义。
本课题从建立丝光绿蝇幼虫活性检测手段入手,研究了影响酶活性的一系列因素,确定了纯化的最佳条件,设计出一套可行的实验方案,对丝光绿蝇幼虫分泌物抗菌肽进行了纯化,获得了以下结果1.考察了抗菌肽活性检测方法,最终选择浊度法作为丝光绿蝇抗菌肽活性的最终的测定方法。2.通过实验证明了丝光绿蝇分泌物中抑菌成分为蛋白类物质,选择DEAE-sepharose离子交换柱作为初级纯化手段,优化了DEAE-sepharose梯度洗脱条件。3.设计出一套较为合理而有效的纯化丝光绿蝇分泌物的方案。第一步采用DEAE-Sepharose离子交换层析分离,收集活性组分进行第二步Superdex-75凝胶过滤层析分离,同时用电泳检测分离纯化的效果。SDS-PAGE上用银染的方法呈单一蛋白质条带。4.用肽质谱方法获得了该蛋白肽的生物学信息,并且通过质谱对其进行了鉴定分析。获得大量抗菌肽的信息,可作为基因工程的方法药物开发的基础。