中文摘要：

足月新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）使用肺表面活性物质制剂疗效不如早产儿，病死率高。妊娠肝内胆汁淤积综合征可增加足月儿NRDS发病率，但原因不清楚。近期研究及我们的预实验结果提示高胆酸羊水浸润胎儿肺组织致肺Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）凋亡可导致NRDS，ACEⅡ凋亡的细胞信号通路可能是自噬/溶酶体凋亡途径。自噬/溶酶体凋亡不依赖Casepase的表达，为干预细胞凋亡增加了机会。本项目拟通过研究胆酸作用于AECⅡ细胞后，依次通过胆酸受体、胞内Ca2+浓度、calpain、自噬、溶酶体膜通透性增强（LMP）、组织蛋白酶、线粒体膜通透性增强（MOMP）诱导凋亡的作用及其相互关系；并通过单克隆抗体及RNAi技术抑制细胞信号转导过程中的关键分子；明确自噬/溶酶体凋亡途径在胆酸损伤AECⅡ中的作用，初步确定其分子信号通路；在此基础上寻找干预自噬/溶酶体凋亡的药物靶点，为防治足月儿NRDS提供新思路。

结论摘要：

项目组按照研究计划，围绕妊娠肝内胆汁淤积综合征中胆酸诱导新生儿呼吸窘迫综合征的发病机制进行研究，目前主要完成了3个方面的工作 1） 研究证实妊娠肝内胆汁淤积综合征孕妇血清与羊水中高浓度胆酸可显著增加新生儿肺损伤的发病率，并确定了血清与羊水中胆酸的危险值。项目组通过临床研究发现，妊娠肝内胆汁淤积综合征相关新生儿肺损伤以暂时性呼吸过快，新生儿肺炎及急性呼吸窘迫综合征为主要类型；孕妇血清与羊水甘胆酸与新生儿肺损伤发病率相关性较好。血清甘胆酸上升至40μg/ml，或当血清总胆汁酸上升至30μmol/L时，羊水甘胆酸及总胆汁酸异常率也为75%左右，此时新生儿发生肺损伤的几率明显增加。研究结果发表在第三军医大学学报上。2）研究发现胆酸的主要成分甘氨鹅脱氧胆酸（Glycochenodeoxycholate，GCDC）在体外能够诱导原代培养的新生鼠AECⅡ死亡，包括凋亡和坏死。并且，GCDC可使AECⅡ所分泌的表面活性物质明显减少，从而参与新生儿呼吸窘迫综合征的发病机制。项目组深入探讨了GCDC诱导体外原代培养AECⅡ细胞死亡的机制，发现200μmol/L的GCDC在体外可诱导AECⅡ发生线粒体片段化和功能紊乱，并诱导caspase3依赖的细胞凋亡，1000μmol/L的的GCDC则主要诱导AECⅡ坏死。研究结果发表于SCI杂志Free Radical Biology & Medicine（IF: 5.423）。 3）项目组研究发现自噬/溶酶体凋亡通路相关标志物LC-3II在GCDC处理的肺癌上皮细胞株A549中表达水平明显下降，提示自噬受到抑制；GCDC能增加胞内Ca2+浓度，提示GCDC可能与膜受体结合调节胞内Ca2+浓度，从而调整溶酶体的通透性; GCDC处理AECII能降低溶酶体的pH值。上述结果都提示GCDC可能会损伤溶酶体活性和通透性，进而导致细胞死亡。本项目已发表SCI论文1篇，中文论著2篇，拟再发表SCI论文1篇。