γ-氨基丁酸具有多种重要的生物学功能,利用乳酸菌生物合成γ-氨基丁酸已成为引人关注的新型技术。近年来有关菌种与工艺方面的研究较多,但对负责合成γ-氨基丁酸的谷氨酸脱羧酶系统的元件组成、结构及其表达调控机制,尚未见深入的工作和报道。我们前期克隆到了高产γ-氨基丁酸的短乳杆菌NCL912的谷氨酸脱羧酶基因(gadB)及其侧翼序列。序列分析表明,谷氨酸脱羧酶系统可能组成操纵子。基于对国内外相关研究进展的了解和前期研究基础,本课题拟进行以下几方面的研究,包括该系统的结构基因(gadCB)和调节基因(gadR)的转录水平;启动子的克隆与鉴定;调控蛋白的纯化及其编码基因的克隆;调控蛋白特异识别的DNA区域及其序列分析;构建突变株NCL912△gadR,并与野生菌gadCB的转录水平和γ-氨基丁酸合成能力进行比较,分析gadR对gadCB转录的调控方式。旨在证实谷氨酸操纵子结构,并探索其表达调。
英文主题词γ-aminobutyric acid;Lactobacillus brevis NCL912;glu operon;resolution;expression and regulation