我们的研究证明了灰葡萄孢菌IPC合成酶是一个疏水膜蛋白,由339个氨基酸构成,其编码基因为AUR1基因。通过紫外和化学诱变剂诱变灰葡萄孢菌,经AbA筛选,获得三类抗AbA的突变菌株。第一类是AUR1基因缺失内含子,第二类是既在AUR1基因中缺失内含子,又在IPC合成酶中有氨基酸突变,第三类是IPC合成酶中有氨基酸突变。AbA强烈抑制野生型菌株的IPC合成酶活力,引起神经酰胺积累,导致细胞形态发生显著变化,这些结果证明了IPC合成酶是真菌细胞鞘酯类合成以及生长和发育的必需基因。突变体则抵抗AbA对IPC合成酶的抑制作用,对神经酰胺影响较小,细胞形态正常。AbA还能降低野生型菌株草酸、纤维素酶和果胶酶分泌,抑制真菌对果实感染,削弱真菌致病力。相反,突变体表现出抵抗AbA引起的这些影响,增加了病源真菌的致病力。本研究首次发现AUR1基因缺失内含子在抗AbA机制中发挥着重要的作用,说明突变体获得AbA抗性是不同的途径,它们的抗性机理也是不同的。通过序列比较和分析,明确了IPC合成酶与AbA作用的功能域是该酶的中间区域,相互作用的关键氨基酸是L197和P155。
英文主题词Botrytis cinere; AbA; AUR1; IPC synthase; mutant