近年来,由细菌、病毒、寄生虫等病原微生物引起的食源性疾病的人数显著增长,食源性病原微生物是继农兽药残留得到有效控制之后成为影响食品安全的主要因素,因此,设计和开发快速、准确检测食源性病原菌的检测方法具有重要的意义。在多年研究酶底物合成技术和研制细菌检测显色培养基的基础上,在本项目中,申请者将设计和实现一种新的食源性病原菌检测方法。该方法综合设计和合成糖苷酶底物、脂肪酶底物、磷酸酯酶底物和肽酶底物,利用不同酶底物在细菌作用下释放出不同的荧光分子,开发一种"鸡尾酒"式酶测定方法,实现一次测定多种食源性病原菌,同时开发一种使用多种固定酶底物的细菌特征性图谱聚类分析检测技术,提供快速、简单和廉价的食品微生物检测平台。
Enzyme substrate;synthesis;fluorogenic substrate;pathogenic bacteria;detection
近年来由细菌、病毒和寄生虫等食源性病原微生物感染引起的病例显著增加,已经成为影响食品安全的主要因素之一,因此设计和开发快速、准确检测食源性病原菌的方法具有重要的理论意义和实用价值。在多年研究显色培养基和合成糖苷酶底物的基础上,申请者在本项目中设计和合成了一系列基于不同结构荧光团的糖苷酶底物、脂肪酶底物、磷酸酯酶底物和肽酶底物,利用酶底物在不同细菌特有的内源性酶作用下释放出不同的荧光分子,初步成功地开发了一种可以同时测定多种食源性病原菌的基于荧光酶底物的“鸡尾酒”测定方法模型。后续的研究将集中在优化酶底物的组合,优化荧光分子的波长,以期开发可直接用于病原菌检测的微型设备与配套试剂盒。