本项目分离并鉴定了烟草曲茎病毒(TbCSV)和赛葵黄脉病毒(MYVV)DNAβ分子上βC1基因的启动子。通过组织化学法和荧光光度法测定启动子的活性,瞬时表达结果表明,TbCSV βC1基因翻译起始位点上游的997 nt片段和5′端缺失片段200 nt都具有启动子活性,约是花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子活性的40%;MYVV βC1 基因翻译起始位点上游的991 nt片段和5'端缺失片段以及A-rich区缺失的片段均保留了启动子活性,其中991 nt片段的启动子活性是35S启动子活性的28.05%。转基因植株的组织化学分析表明,TbCSV βC1翻译起始位点上游的997 nt和200 nt片段以及MYVV βC1翻译起始位点上游的991 nt和214 nt片段均是组成型表达的启动子。利用Overlap Extension PCR的方法对TbCSV和中国番茄黄花曲叶病毒卫星的βC1 ORF及其上游约430 nt的片段分别进行互换。研究结果表明,DNAβ编码的βC1蛋白对病害复合体TbCSV/DNAβ和TYLCCNV/DNAβ产生的症状差异起主导作用,但βC1的启动子也能影响症状诱导。
英文主题词satellite DNA; promoter; activity; expression pattern; phenotypic differences